Бруцеллы входят в род Brucella, который включает шесть видов: B. abortus — возбудитель бруцеллеза крупного рогатого скота; B. melitensis — овец и коз; B. suis – свиней; B. canis — собак; B. neotomae — кустарниковых крыс; B. ovis — инфекционного эпидидимита баранов.

Бруцеллы были обнаружены в 1886 г. Д. Брюсом при микроскопии мазков из селезенки солдата, умершего от мальтийской лихорадки, а в 1887 г. этот же ученый выделил чистую культуру и возбудителя назвал Micrococcus melitensis. Б. Банг и В. Стрибольт в 1897 г. из околоплодной жидкости коровы выделили второй вид — Bac. аbortus bovis. А в 1914 г. Дж. Траум выделил от абортировавшей свиньи третий вид — B. abortus suis. В 1920 г. Майер и Физье объединили все эти три микроба в одну группу и назвали бруцеллами, по фамилии открывшего их ученого Д. Брюса.

Бруцеллы являются возбудителями бруцеллеза — хронической инфекционной болезни животных и человека. Резервуар и источник инфекции — домашние животные (овцы, козы, коровы, свиньи, реже собаки). Патогенными для человека являются B. abortus, B. melitensis, B. suis, B. canis. Заболеваемость людей бруцеллезом носит, прежде всего, профессиональный характер. Человек заболевает при непосредственном контакте с больными животными, а также при употреблении в пищу зараженных продуктов — мяса, молока и т. д.

Морфология. Бруцеллы — мелкие коккобактерии (0,3– 0,6 мкм) или палочки (0,6–2,5 мкм), грамотрицательные, в окрашенных препаратах располагаются одиночно и небольшими группами. Неподвижные, спор не образуют. Мукоидные и гладкие варианты синтезируют микрокапсулу.

Культивирование. Бруцеллы могут расти на обычных питательных средах при температуре 36–38°С и рН 6,8–7,2. Однако для их культивирования используют специальные среды: мясопептонный печеночный бульон (МППБ); мясопептонный печеночно-глюкозно-глицериновый агар (МППГГА); печеночно-глюкозно-глицериновый бульон и агар (ПГГБ, ПГГА) с 1% глюкозы и 2-3% глицерина; картофельный агар; сывороточнодекстрозный агар и др. При первичном выделении они растут

очень медленно, в среднем 15–20 сут., в то время как старые культуры вырастают уже через 24–48 ч.

Биохимические свойства. Сахаролитическая активность у бруцелл выражена слабо. Они утилизируют углеводы, но не об- разуют кислоту и газ в количествах, достаточных для их иден- тификации. Нитраты редуцируют в нитриты. Молоко не свер- тывают, желатин не разжижают. Некоторые виды гидролизу- ют аминокислоты с образованием аммиака.

Устойчивость. Бруцеллы малоустойчивы к действию раз- личных физических и химических факторов. Агаровые куль- туры в запарафинированных пробирках сохраняются несколько недель, лиофильно высушенные — годами. Прямые солнечные лучи убивают их за 4,5 ч. В воде бруцеллы выживают более 5 мес., в поверхностном слое почвы — 40 сут., на глубине 5–8 см — до 3 мес., в навозе при медленном высушивании — до 120 сут., в моче коров — до 4 сут., в почве зимой — 4–5 сут., в высушенных околоплодных оболочках — до 120 сут. В охлажденном молоке сохраняются 6–8 сут., в кислом молоке — 1–4, в масле — 40–60, в сырах — более 42, в брынзе (5–11%-ный раствор поваренной соли) — 45–60, в замороженном мясе — свыше 320 сут., в засо- ленных шкурах — 2 мес., в шерсти — до 3–4 мес.

При температуре 60°С бруцеллы погибают через 30 мин, при 80–85°С через 5 мин, при 100°С мгновенно. Пастеризацию мо- лока проводят при 85–90°С 30 мин.

Дезинфицирующие растворы — 2%-ный фенол; 1%-ный креолин; 1–2%-ный формалин; 0,5–1%-ный хлорамин; 1%-ная соляная кислота; 3%-ный гидроксид натрия; 5%-ная хлорная известь убивают бруцеллы в течение нескольких минут.

Патогенность. Образование экзотоксинов у бруцелл не ус- тановлено, их патогенное действие связано с эндотоксином. Они также синтезируют гиалуронидазу, каталазу, уреазу. Бруцел- лы высокоинвазивны, могут проникать через неповрежденные слизистые покровы пищеварительного тракта, легких, глаз и кожу. К ним восприимчивы овцы, козы, крупный рогатый скот, буйволы, свиньи, лошади, мулы, верблюды, северные олени, собаки, кошки и многие дикие животные. Каждый вид бруцелл поражает животных определенного вида, но бруцеллы могут мигрировать, заражая животных другого вида. Для человека наиболее опасен вид B. melitensis.

Возбудитель проникает в организм человека через поврежденную кожу, слизистую оболочку дыхательных путей и желудочно-кишечный тракт при оказании помощи больным животным, при патологических родах. В странах, где отсутствует массовая пастеризация молока, бруцеллез более распространен.

Лабораторная диагностика. Для диагностики бруцеллеза используют бактериологический, биологический, серологический и аллергический методы.

В лабораторию направляют абортированный плод с плодовыми оболочками или желудок плода с содержимым, кусочки печени селезенки, содержимое гигром, абсцессов, молоко; от убитых животных — лимфоузлы, кусочки паренхиматозных органов, костный мозг, матку, яичники, семенники, вымя; от баранов — семенники с придатками. Для серологического исследования направляют кровь или сыворотку крови и молоко.

Бактериологическое исследование. Патологический материал высевают на ПГГБ, ПГГА, МППБ, МППГГА или сывороточный декстразный агар. С целью подавления посторонней микрофлоры в питательные среды можно добавлять генцианвиолет (1:200 000) или кристаллвиолет (1:100 000). При исследовании материала от крупного рогатого скота одну часть посевов инкубируют в атмосфере с содержанием 10–15% СО2, другую — в обычных условиях. Для выделения культур В. ovis и В. abortus используют плотные или полужидкие печеночносывороточный или печеночно-аминопептидный агар при содержании 10–15% СО2. В. melitensis растет в обычных атмосферных условиях. Посевы инкубируют при 37–38°С в течение 30 сут.

Культуры бактерий, обладающие типичными морфологическими, тинкториальными и культуральными свойствами, дающие положительную РА с позитивной бруцеллезной сывороткой, относят к бруцеллам.

Виды бруцелл дифференцируют по способности роста в отсутствие повышенной концентрации СО2, выделению H2S, чувствительности к фагу, бактериостатическому действию некоторых анилиновых красок и агглютинации моноспецифическими сыворотками.

Биопробу осуществляют на двух морских свинках, у которых на 15, 25 и 40-е сутки после заражения берут кровь, получают сыворотку и исследуют ее в пробирочной РА в титрах от 1:10 до 1:80. Результат считают положительным, если обнару- жена положительная РА в титре 1:10 и выше. Для выделения чистой культуры бруцелл морских свинок убивают и делают посевы из лимфоузлов, селезенки, печени и костного мозга.

Серологические методы. Применяют пробирочную реакцию агглютинации (РА), реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию длительного связывания комплемента (РДСК), пла- стинчатую реакцию агглютинации с роз бенгал антигеном (роз бенгал проба — РБП) и кольцевую реакцию с молоком (КР).

РА ставят в объеме 1 мл с единым бруцеллезным антигеном для РА, РСК и РДСК. Сыворотки крови овец, коз, буйволов, оленей и собак исследуют в разведениях 1:25, 1:50, 1:100, 1:200; крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов — 1:50, 1:100, 1:200 и 1:400. РА считают положительной при наличии агглю- тинации с сыворотками крови крупного рогатого скота, лоша- дей и верблюдов, начиная с разведения 1:100 (100 ME); овец, коз, буйволов, оленей и собак — с 1:50 (50 ME) с оценкой не менее чем на два креста. Сомнительной — при наличии аг- глютинации только в разведении 1:50 (50 ME) с сыворотками крови крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов и 1:25 (25 ME) — с сыворотками овец, коз, буйволов, оленей и собак с оценкой не менее чем на два креста.

РСК — специфичный и высокочувствительный метод диаг- ностики бруцеллеза животных. Ее показания более постоянны и сохраняются дольше: комплементсвязывающие антитела по- являются позже, чем агглютинины. Эта реакция позволяет вы- явить большее количество больных в стадах с давней инфекци- ей. РСК применяют при диагностике бруцеллеза у вышепере- численных видов животных, а также свиней.

РДСК — более чувствительный тест, чем РСК. При инфек- ционном эпидидимите баранов используют только РДСК с овис- ным антигеном.

РБП используют для исследования сывороток крови круп- ного рогатого скота, овец, коз, лошадей, свиней, буйволов, верб- людов и оленей. Реакцию проводят при температуре 18–30°С с бруцеллезным антигеном, окрашенным бенгальским розовым, на пластинках с лунками. При положительной реакции в тече- ние 4 мин появляются хлопья агглютината розового цвета.

КР ставят с цельным свежим или консервированным формалином молоком коров и антигеном взвесью убитых бруцелл, окрашенных гематоксилином. При наличии в молоке специфических антител происходит агглютинация антигена, образовавшийся комплекс адсорбируется сливками молока и поднимается с ними вверх, образуя четкое фиолетовое кольцо. Эту реакцию ставят на рынках для проверки благополучия стад (ферм) по бруцеллезу крупного рогатого скота.

Для выявления бруцелл непосредственно в патологическом материале, а также в объектах окружающей среды предложен прямой метод иммунофлюоресценции (РИФ); непрямой метод позволяет обнаружить антитела в сыворотке крови больных, переболевших или вакцинированных животных.

Аллергический метод. Для аллергической диагностики бруцеллеза овец, коз и свиней используют бруцеллин ВИЭВ, приготовленный из неагглютиногенного и авирулентного штамма В. abortus В-1. У овец и коз применяют пальцебральную пробу, свиньям препарат вводят внутрикожно с наружной стороны ушной раковины. У животных, больных бруцеллезом, на месте введения бруцеллина развивается воспалительная реакция.

Иммунитет и средства специфической профилактики. Иммунитет при бруцеллезе инфекционный, который постепенно переходит в постинфекционный и сопровождается освобождением организма от возбудителя.

Для специфической профилактики бруцеллеза были предложены живые и убитые вакцины. Применяется живая вакцина из штамма №19 B. abortus, сухая живая вакцина из слабоагглютиногенного штамма №82 B. abortus. Против бруцеллеза мелкого рогатого скота — сухая живая вакцина, приготовленная из культуры B. melitensis штамма Рев-1.

Профилактика заболеваний человека определяется эффективностью профилактики бруцеллеза среди животных. Снижению заболеваемости способствует элементарное соблюдение правил личной гигиены и режима обработки сельскохозяйственной продукции, например обязательной пастеризации молочных продуктов.

Количество бруцелл в молоке от больных животных может доходить до десятков тысяч в 1 мл. Молоко от коров, положительно реагирующих на бруцеллез, перерабатывают на топленое молоко или кипятят в течение 5 мин, после чего используют только внутри хозяйства. Молоко, полученное от коров оздоравливаемого стада, запрещается направлять на рынок, в столовые и на маслозавод. Его обезвреживают путем пастеризации в хозяйстве при 70°С в течение 30 мин или при 85°С — 20 с. Если нет пастеризатора, то молоко кипятят, после чего вывозят на маслозавод или используют внутри хозяйства.