Вобудитель туляремии — франциселлы — очень мелкие полиморфные бактерии. Род Francisella представлен двумя видами, один из них — Francisella tularensis — патогенный. Этот вид вызывает туляремию, природно-очаговую инфекционную болезнь животных, характеризующуюся лихорадкой, параличами у молодняка, увеличением лимфатических узлов, абортами.
Морфология. В окрашенных мазках возбудитель туляремии имеет кокковидную или палочковидную форму 0,3–0,7 мкм в длину и 0,2–0,4 мкм в ширину. Кокковидные формы чаще находят в культурах, палочковидные — в организме животных.
Микроб неподвижен, спор не образует, имеет небольшую капсулу; в культурах продуцирует слизь, легко обнаруживаемую при изготовлении мазков. В мазках-отпечатках из органов павших животных хорошо красится по Романовскому — Гимза, приобретая сиреневый цвет. В тканях бактерии биполярно не окрашиваются, чем и отличаются от пастерелл.
Культивирование. Возбудитель туляремии не растет на обычных питательных средах. Для ее культивирования применяют свернутую желточную среду Мак-Коя (60% желтка куриных яиц и 4% физиологического раствора). Используют также среду Френсиса (2,5% мясопептонного агара, 0,1% цистина, 1% глюкозы и 5–10% дефибринированной кроличьей крови), полужидкую желточную среду Дрожевкиной (10% куриного желтка и 90% стерильного физиологического раствора), кровяной рыбно-дрожжевой агар с глюкозой и цистином и др.
Туляремийная бактерия — строгий аэроб. Оптимум температур 36–37°С, рН среды 7,0–7,2. На свернутой желточной среде микробы растут в виде блестящего тонкого налета с извилистой
(«шагреневой») поверхностью; при скудном росте вырастают небольшие блестящие выпуклые колонии. Колонии патогенных штаммов имеют S-форму. В жидких питательных средах туля- ремийный микроб растет значительно хуже (только на поверх- ности среды).
Биохимические свойства. Бактерия туляремии не обладает выраженной биохимической активностью. Микроб ферменти- рует с образованием кислоты без газа глюкозу, мальтозу, в ряде случаев — левулезу и маннозу; не сбраживает лактозу, сахаро- зу, рамнозу, маннит; образует сероводород и редуцирует тио- нин, метиленовый голубой, малахитовый зеленый.
Устойчивость. В воде или влажной почве при 4°С сохраня- ется без снижения вирулентности свыше 4 месяцев, в воде при 20–25°С — 10–15 сут., в зерне и соломе при температуре ниже 0°С — до 6 мес., при 8–12°С — 56 сут., при 20–30°С — не более 20 сут. В замороженном мясе возбудитель жизнеспособен до 93 сут., в молоке и сливках при 8–10°С — не менее 3 нед., в за- мороженном молоке — до 104 сут. В замороженных трупах животных, павших от туляремии, — свыше 3 мес., в их шку- рах при 8–12°С — более месяца, при 32–33°С — 1 нед. Микроб устойчив к высушиванию.
Особенно чувствителен к этиловому спирту (погибает через 0,5–1 мин). Неустойчив к обычным дезинфектантам — лизолу, фенолу, креолину, но наиболее к хлорной извести. Чувствите- лен ко многим антибиотикам — стрептомицину, левомицети- ну, тетрациклину, неомицину, канамицину; устойчив к пени- циллину.
Патогенность. Бактерия патогенна для зайцев, полевок, домовых мышей, сусликов, крыс. Сельскохозяйственные жи- вотные относительно устойчивы к туляремии, заболевают спо- радически, болезнь часто протекает в скрытой форме. Наибо- лее восприимчивы ягнята и поросята, болеют лошади, ослы. Чувствительны буйволы, верблюды, северные олени. Взрослые овцы устойчивы к заболеванию, еще более резистентны козы. Восприимчивы кролики, болезнь у которых протекает без ха- рактерных признаков и может иметь сходство с псевдотуберку- лезом и хронической формой пастереллеза. Из птиц восприим- чивы куры, особенно цыплята. К заражению чувствительны морские свинки и белые мыши.
Туляремией болеет и человек, однако заболевание протекает относительно доброкачественно и больной не представляет опасности для окружающих.
Патогенез. Заражение происходит алиментарным, воздушно-капельным и трансмиссивным путями. Бактерии могут проникать в организм через неповрежденные кожные покровы, конъюнктиву и дыхательные пути. Возбудитель, размножаясь на месте внедрения, сначала попадает в лимфатические узлы, затем проникает в кровь и вызывает септицемию.
Лабораторная диагностика. При взятии, доставке в лабораторию и исследовании материала на туляремию необходимо соблюдать меры предосторожности, предусмотренные правилами работы с особо опасными инфекциями. Материалом для исследования служат печень, почки, селезенка, увеличенные лимфатические узлы, взятые от трупов крупных животных; трупы грызунов направляют целиком.
Схема исследования материала включает бактериоскопию, выделение чистых культур и биологическую пробу.
Мазки-отпечатки из органов животных окрашивают по Романовскому — Гимза, учитываются большие скопления коккобактерий сиреневого цвета. Бактериоскопию следует рассматривать как ориентировочный метод.
Для индикации бактерий используют реакцию прямой иммунофлюоресценции, однако этот метод является ориентировочным, и положительные результаты должны подтверждаться выделением культуры возбудителя. Для этой цели проводят посев патологического материала на специальные питательные среды. Свежевыделенную культуру идентифицируют по морфологическим, тинкториальным свойствам, характеру роста на свернутой желточной среде, отсутствию роста на обычных питательных средах, а также по результатам пробирочной РА со специфической агглютинирующей сывороткой.
Биологическая проба. Это самый чувствительный и надежный метод для обнаружения туляремийных бактерий в любом материале. Заражают белых мышей, реже морских свинок. Суспензию из кусочков органов и лимфатических узлов вводят в дозе 0,5 мл подкожно или интраперитонеально или втирают в свежевыстриженный участок кожи. Белые мыши погибают через 3– 4 сут., иногда через 8–12 сут., морские свинки — на 4–6-е сутки.
Серологический диагноз. Осуществляют с помощью реакций агглютинации, преципитации, непрямой гемагглютинации и реакции нейтрализации.
РА — достаточно точный метод исследования на туляремию. Антигеном служит туляремийный диагностикум, взвесь из мик- робных клеток, убитых формалином. РА ставят двумя способа- ми: пробирочным и кровяно-капельным. Диагностические тит- ры при туляремии нужно считать следующим образом: для овец — 1:25; для крупного рогатого скота и свиней — 1:100.
Реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) ставят с эрит- роцитами, сенсибилизированными туляремийным антигеном или с антительным эритроцитарным диагностикумом.
Аллергический метод. Гиперчувствительность замедленно- го типа у животных при туляремии развивается рано и сохра- няется длительное время, поэтому аллергический метод может быть использован для ранней и ретроспективной диагностики. Аллергеном служит тулярин; препарат вводят внутрикожно, реакцию учитывают дважды — через 24 и 48 ч.
Иммунитет и средства специфической профилактики. У жи- вотных, переболевших туляремией, создается стойкий и длитель- ный иммунитет, имеющий в своей основе тканевые и гумораль- ные механизмы. В сыворотках переболевших животных обнару- живают агглютинины, довольно рано формируются клеточные реакции защиты. Для сельскохозяйственных животных вакци- на не разработана.
Для профилактической иммунизации человека применяют сухую живую вакцину против туляремии, предложенную в 1946 г. Н. А. Гайским и Б. Я. Эльбертом.