2.12. ВОЗБУДИТЕЛИ НЕКРОБАКТЕРИОЗА, КОПЫТНОЙ ГНИЛИ И МЕЛИОИДОЗА ЖИВОТНЫХ ВОЗБУДИТЕЛЬ НЕКРОБАКТЕРИОЗА

Некробактериоз (Necrobacteriosis) — инфекционная болезнь многих видов домашних и диких млекопитающих животных, характеризующаяся гнойно-некротическими поражениями кожи, слизистых оболочек, внутренних органов и конечностей.

В 1881 г. Р. Кох выделил возбудителя некробактериоза, а в 1882 г. он был подробно описан Ф. Леффлером.

Морфология. Возбудитель — Fusobacterium necrophorum, входит в род Fusobacterium (веретенообразных). Это полиморфный неподвижный микроорганизм, спор и капсул не образует, грамотрицательный. В мазках из свежего материала имеет вид отдельных палочек шириной 0,5–1,5 и длиной 1,5–3,0 мкм или длинных нитей (от 30 до 400 мкм). Хорошо красится фуксином Циля, синькой Леффлера, а также по методу Муромцева. При окраске обычными анилиновыми красителями окрашивается неравномерно.

Культивирование. Фузобактерии — облигатные анаэробы. Выделение чистой культуры возбудителя из гнойно-некротических поражений нижних частей конечностей сопряжено с трудностями, главным образом вследствие ассоциации с другими микробами, особенно стрептококками и стафилококками.

Чистую культуру легче получить из внутренних органов пораженного животного — печени, селезенки, легких. Из некротической ткани кожи материал берут из участков, граничащих со здоровой тканью (прижизненные соскобы).

Для культивирования возбудителя используют среду Китта — Тароцци, бульон Мартена, печеночный бульон Хоттингера, сывороточный и глюкозо-кровяной агары, полужидкий агар, мозговую среду. Добавление к среде Китта — Тароцци 10–20% свежей бычьей сыворотки, 0,2–0,5% глюкозы или дрожжевого экстракта приводит к более интенсивному росту микроорганизма. В среде Китта — Тароцци через 24–48 ч происходит помутнение среды, на 5–8 сут. наступает просветление среды и выпадение крошковидного осадка, разбивающегося при встряхивании в равномерную муть. При посеве в сывороточный агар (столбиком) на 3–4 сут. в глубине среды появляются небольшие чечевицеобразные колонии, от которых отходят волокнистые отростки.

На поверхности глюкозо-кровяного агара бактерии растут при создании анаэробных условий, на 2–3 сут. появляются мелкие росинчатые колонии, иногда колонии окружены незначительной зоной гемолиза. Поверхность колоний гладкая, матовая.

Микроорганизм хорошо растет на мозговой среде и при добавлении 0,05% сернокислого железа. Среда чернеет за счет образования сероводорода.

Биохимические свойства. Фузобактерии — хемоорганотрофы, одни из них обладают сахаролитической активностью, другие не ферментируют сахара, но зато ферментируют пептоны. Fusobacterium necroforum ферментирует с образованием кислоты и газа арабинозу, глюкозу, галактозу, левулезу, мальтозу, сахарозу, салицин. Слабо ферментирует лактозу. Желатин и свернутую сыворотку не разжижает; не свертывает яичный белок; слабо и непостоянно пептонизирует молоко; образует индол и сероводород. Аммиак не вырабатывает. Не восстанавливает нитраты в нитриты. Различная биохимическая активность фузобактерии может быть использована для их идентификации.

Устойчивость. Возбудитель некробактериоза — относительно нестойкий микроб, но длительное время сохраняет жизнеспособность в объектах окружающей среды.

При воздействии прямых солнечных лучей погибает через 12 ч, в замороженном состоянии бактерии выживают 30– 40 сут. При нагревании до 65°С они гибнут в течение 15 мин.,

при 70°С — через 10 мин, при кипячении — мгновенно; 5%-ные растворы гидроксида натрия или калия убивают их через 10 мин, 2,5%-ный раствор креолина — через 20, 5%-ный лизол — через 9, 2%-ный фенол убивает через 2 мин.

Фузобактерии могут долгое время сохраняться и размножаться в слежавшемся навозе, на это указывает частота заболеваний при нахождении животных в обильно унавоженных местах.

Патогенность. В естественных условиях некробактериозом болеют лошади, крупный рогатый скот, буйволы, олени, овцы, козы, свиньи, собаки, кошки, куры, гуси, а также дикие животные — косули, лоси, архары, антилопы, ламы, зебры, бегемоты, бобры, сурки, суслики. К некробактериозу восприимчив и человек. Из лабораторных животных особо чувствительны к нему кролики и белые мыши. В форме тяжелых эпизоотий и энзоотий с высокой смертностью некробактериоз наблюдают у оленей, крупного рогатого скота, овец, свиней.

Естественным резервуаром возбудителя в природе служит желудочно-кишечный тракт здоровых животных. Заражение происходит по типу раневой инфекции через поврежденную кожу или слизистые оболочки. Возбудитель передается через почву, подстилку, корма, предметы ухода за животными.

Лабораторная диагностика осуществляется на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований. Для некробактериоза характерно наличие гнойнонекротических поражений нижних частей конечностей, кожи лицевой части головы, вымени, слизистых оболочек ротовой полости, половых органов. В лабораторию направляют кусочки пораженных органов и тканей с прилегающей здоровой тканью, целые трупы мелких животных, птиц.

Для прижизненного исследования берут некротические поражения на границе омертвевшей и здоровой тканей после предварительной очистки от распавшейся ткани и гноя. Из этих же участков готовят препараты-отпечатки. При поражении ротовой полости берут слюну больного животного. Патологический материал консервируют в случае необходимости в 30%-ном стерильном глицерине.

Мазки, приготовленные из некротизированной ткани, фиксируют спирт-эфиром 10 мин и окрашивают синькой Леффлера

или по методу Муромцева, Романовского — Гимза, а также по Граму. В мазках обнаруживаются зернисто окрашенные нити или тонкие длинные грамотрицательные палочки.

Для посевов на среды используют кусочки некротизирован# ной ткани, отобранной на границе со здоровой, которые поме# щают в среду Китта — Тароцци с добавлением 10% свежей кро# ви и 0,5% глюкозы при рН 7,4–7,6. Посевы инкубируют до 3 сут. при 36–38°С. Культуры выращивают в анаэробных условиях. Одновременно проводят биопробу. Кролика заражают подкож# но с наружной стороны уха в дозе 0,5–1 мл. Через 2–4 сут. на месте введения развивается некротический очаг, на 6–10 сут. кролик обычно погибает. При вскрытии обнаруживают некро# тические очаги в мышцах головы, брюшной стенки, сердца, в печени.

Белых мышей заражают бульонной культурой в дозе 0,3– 0,5 мл подкожно в области корня хвоста. Мыши погибают на 10–14 сут. с явлениями некроза мышц, гнойными очагами в печени, легких, сердце.

Иммунитет и средства специфической профилактики. Пе# реболевшие животные приобретают нестойкий иммунитет.

Для специфической профилактики разработан «Нековак» — ассоциированная вакцина против некробактериоза конечностей крупного рогатого скота. Лечение проводят комплексно на спе# циально оборудованных для этой цели площадках с помощью химиопрепаратов, сульфаниламидов и антибиотиков тетрацик# линового ряда, пенициллинов и др.

ВОЗБУДИТЕЛЬ

КОПЫТНОЙ ГНИЛИ

Возбудитель — Bacteroides nodosus относится к семейству Bacteroidaceae, роду Bacteroides, вызывает инфекционную бо# лезнь у овец и коз, характеризующуюся мацерацией и воспале# нием кожи свода межкопытной щели, прогрессирующим гной# но#гнилостным распадом копытного рога и хромотой.

Болезнь регистрируют во всех странах мира, где развито овцеводство, главным образом в зонах с повышенной влажно# стью, на сырых пастбищах.

Морфология. Возбудитель — крупная (6–8 мкм) прямая или слегка изогнутая, грамотрицательная, неподвижная, полиморф#

ная палочка с утолщениями на одном или обоих концах. Спор и капсул не образует. По внешнему виду напоминает гантели.

Культивирование. Bact. nodosus — облигатный анаэроб. Весьма требователен к составу питательных сред, его удается культивировать в полужидкой среде Китта — Тароцци и жид% кой питательной среде из экстракта головного мозга с добавле% нием 2–5% триптического перевара порошка копытного рога. На этих средах микробы растут в виде тяжей, на дне пробирки образуют осадок. На лактоальбуминовом агаре вырастают пло% ские блестящие шероховатые колонии.

Устойчивость возбудителя к факторам окружающей сре% ды незначительная. На пастбищах микроб сохраняется не бо% лее двух недель. Нагревание до 90°С убивает его за 1 мин. Де% зинфицирующие растворы креолина (3%), формалина (0,5%), фенола (2%) убивают в течение 15–20 мин. При доступе возду% ха он погибает через 24 ч, однако в пораженном роге сохраня% ется до трех лет.

Лабораторная диагностика. Диагноз ставят на основании анализа эпизоотологических и клинических данных, результа% тов бактериологической диагностики и биологической пробы.

Бактериологическая диагностика осуществляется по об% щепринятой методике. Для исследования берут свежепора% женные участки основы кожи копытец и слизь, покрываю% щую кожу межпальцевых щелей. Для биопробы используют ягнят.

Для серологической диагностики копытной гнили предло% жена РСК. Комплементсвязывающие антитела у животных по% являются с началом заболевания, достигают максимальных значений в разгар болезни и угасают с исчезновением клиниче% ских признаков. Идентифицировать возбудителя можно при помощи непрямого метода иммунофлюоресценции.

Данную болезнь следует отличать от некробактериоза, ящу% ра, эктимы, оспы, травматического повреждения копыт.

Иммунитет изучен недостаточно. Установлено, что в сыво% ротке крови больных и вакцинированных животных появля% ются агглютинины к О% и К%антигенам возбудителя, а также комплементсвязывающие антитела. Для активной иммуниза% ции в ряде зарубежных стран (Англия, Австрия, Чехия, Слова% кия) применяют инактивированные вакцины.

Лечение. Больных копытной гнилью животных лечат или убивают. Для лечения используют ножные ванны с 10%-ным раствором сульфата цинка и 5–10%-ным раствором формалина, 10–12%-ным раствором медного купороса. С лечебной целью рекомендуют также антибиотикотерапию.

ВОЗБУДИТЕЛЬ МЕЛИОИДОЗА

(ЛОЖНОГО САПА)

Мелиоидоз — сапоподобное заболевание, преимущественно септикопиемического характера. Возбудитель мелиоидоза — Burkholderia pseudomallei — был открыт А. Уайтмором и К. Кришнасвами в 1911 г. в Рангуне, включен в семейство Burkholderiaceae, род Burkholderia. В естественных условиях им болеют грызуны. К нему восприимчивы лошади, обезьяны, собаки, мелкий рогатый скот, а также человек.

Морфология. Короткие палочки размером 0,8–1,5 мкм, подвижные (лофотрихи), грамотрицательные, располагаются одиночно или в виде коротких цепочек. Спор и капсул не образуют.

Культивирование. Бактерия растет на обычных питательных средах при рН 6,8–7,2. Оптимальная температура — 37°С. На МПА образуются вначале гладкие колонии, затем они становятся шероховатыми и плоскими, через 4–7 сут. появляется желтовато-коричневый пигмент. На картофельной среде — обильный налет кремового цвета.

Культуры ферментируют с образованием кислоты лактозу, глюкозу, мальтозу, маннит и дульцит. Желатин разжижают, сероводород образуют, индол не образуют.

Устойчивость. В почве и воде бактерия сохраняется до 40 сут., в моче — 17, в трупах грызунов — 8 сут., быстро погибает при кипячении; 1%-ный раствор фенола и 0,1%-ный раствор формалина убивают ее в течение 24 ч.

Патогенность. Основной фактор патогенности — эндотоксин; свежевыделенные штаммы образуют гемолизин, а продукты гидролиза возбудителя обусловливают ГЗТ.

Лабораторная диагностика основана на исследовании патматериала с целью выделения чистой культуры возбудителя болезни. На различных этапах бактериологического исследования используют РИФ, РНГА и ИФА. Для серологической

диагностики мелиоидоза применяют пробирочную РА, РСК и

РПГА.

Иммунитет при мелиоидозе изучен слабо. В крови больных животных обнаруживают комплементсвязывающие и агглюти$ нирующие антитела. Средства специфической профилактики отсутствуют.