Автолитические превращения в мышечной ткани после убоя животного представляют собой комплекс биохимических и физико-химических процессов, приводящих к существенному изменению важнейших свойств мяса. В процессе созревания мясо, вследствие изменения белков под действием тканевых ферментов, становится нежным, приобретает свойственный ему вкус и аромат. Впоследствии было установлено, что улучшение консистенции мяса при созревании связано с протеолитическими преобразованиями миофибрил- лярных и саркоплазматических белков и компонентов внутримышечной соединительной ткани.
В связи с важной ролью протеолитических процессов в направленном регулировании и интенсификации технологических процессов большой интерес вызывает изучение внутриклеточных ферментативных систем. Ферменты, функциональные единицы клеточного метаболизма - продуцируются любой живой клеткой. В клетке они находятся в определенном состоянии: одни из них растворены в цитоплазме, другие прочно связаны внутриклеточными организмами или липопротеидными мембранами.
До недавнего времени основную роль в протеолизе животных тканей отводили кислым протеазам - катепсинам, оптимальная активность которых проявляется при рН 2-5. Затем были выявлены протеиназы, которые проявляли максимальную активность в нейтральной среде при рН 7 при наличии ионов Са2+ .
Поскольку ферменты лизосом и Са2-зависимых нейтральных протеи- наз участвуют в процессах деградации белков, целесообразно проследить изменение их свойств при созревании и посоле мяса.
Кислые протеиназы широко распространены в различных органах и тканях животных и локализованы в лизосомах. К настоящему времени в мышечной ткани идентифицирован ряд ферментов эндопептидазного действия - катепсины Вь D, H, L и экзопептидазы - катепсины А, В2 и С.
Доказано, что протеолитическая активность свиной мышечной ткани, практически, не повышается в первые 24 ч хранения мяса при 4 °С, а затем возрастает и максимально проявляется к концу 48 ч хранения. Повышение активности, спустя 24 ч, объясняют значительным подкислением ткани в ре-
зультате интенсивно идущего гликолиза и других превращений в мышцах. При хранении свинины общая протеолитическая активность ее снижалась, хотя к 120 ч она оставалась выше первоначальной.
Проявление активности лизосомальных ферментов при автолизе мяса приводит к деградации актина и миозина в миофибриллах, что способствует размягчению тканей.
Наряду с протеиназами, содержащимися в лизосомах мышц животных, обнаружены ферменты, локализованные в саркоплазме, плазматических мембранах и миофибриллярных структурах. Они обладают протеолитической активностью с оптимумом действия при рН 7-8 и индуцируются поступлением иона Са2+ в клетку мышц.
В процессе автолиза тканей активируется фермент с повышенной чувствительностью к иону Са2+, который при длительном автолизе инактивируется. Исследователи считают, что Са2+-зависимые протеиназы играют определенную роль в изменении миофибриллярной структуры животных тканей при созревании мяса.
Влияние химических факторов на активность катепсинов мяса. Для придания необходимых технологических свойств сырью и получения продуктов со свойственными им качественными показателями, применяют многокомпонентные рассолы, содержащие активаторы тканевых ферментов. Для этого подвергают обработке NaCl с последующим созреванием в посоле. Как известно, хлорид натрия воздействует на белки мяса и повышает их влагосвязывающую способность. В то же время, он заметно влияет на снижение активности протеолитических ферментов мышечной ткани. Так, при введении в свиную мышцу посолочных ингредиентов, по мере проникновения ионов солей в толщу ткани, происходит ингибирование протеолитических ферментов. Причем, оно происходит тем быстрее, чем больше скорость проникновения
Активность лизосомальных гидролаз при добавлении в систему нитрита натрия значительно подавляется. Это объясняется тем, что при оптимальном для действия лизосомальных протеаз уровне рН, лежащем в кислой области, из нитрита натрия образуются такие соединения, как NO3, HNO2 и другие, способные окислять аминокислоты (цистеин, метионин, гистидин и триптофан), необходимые для деятельности ферментов, что приводит к снижению их активности.
Исследуя влияние фосфатов на активность катепсинов, пришли к выводу, что фосфаты усиливают действие катепсина D, улучшая при этом структурные свойства мяса.
Влияние электрических и механических факторов на активность катепсинов мяса при посоле. Инъекция рассола в исходное мясное сырье значительно сокращает продолжительность посола, уменьшает потери белковых и других растворимых веществ мяса, повышает выход продукции после термообработки. При посоле баранины методом струйной инъекции и массировании, мясо имеет более высокую влагосвязывающую способность, пластичность и меньшее напряжение среза. Это происходит за счет ускорения распределения посолочных веществ при тендеризации, перемещения тканевых ферментов в межклеточное пространство и, следовательно, активизации их действия.
Массирование свиной мышечной ткани вызывает разрыхление миофибриллярных структур с высвобождением связей, удерживающих дополнительное количество воды и нарушению целостности мембранных структур, что приводит к повышению проницаемости мышечных тканей для посолочных веществ и высвобождению внутриклеточных ферментов, ускоряющих посол мяса.
При массировании соленой конины в первые 15-20 минут наблюдается интенсивное нарастание свободной активности протеолитических ферментов мяса. Затем в процессе выдержки мяса в посоле в течение 24-30 часов, при температуре 2-4 °С и при повторном массировании в течение 10 мин, она продолжает медленно увеличиваться.
В результате электрических и механических воздействий при посоле мяса возрастает активность тканевых протеиназ. Так, после электромассирования предварительно шприцованной рассолом парной мышечной ткани, активность катепсина D возрастает более чем в 2 раза по отношению к несоленому мясу. Электрические воздействия приводят к разрушению липопроте- идных мембран и выходу ферментов из мест их локализации. После электрического массирования и последующей циклической механической обработки в течение 12 ч, активность ферментов снижается за счет накопления и повышения концентрации ингибитора, а также вследствие денатурации части фермента при интенсивных механических воздействиях. Однако, несмотря на наличие ингибирующих факторов, активность катепсинов в соленом сырье остается выше, чем в исходном, на 35 %.
Применение при посоле мяса, в условиях массирования, лимонной кислоты, ее натриевой или калиевой соли, способствует увеличению выхода готового продукта на 3 %, повышению его сочности и улучшению консистенции. Использование лимоннокислого натрия в процессе посола снижает содержание остаточного нитрита натрия, активирует некоторые ферменты, в частности, фосфатазу и протеиназы, и улучшает вкус продукта.
Таким образом, применение электрических воздействий повышает свободную активность ферментов, ускоряя процесс созревания мяса. Посол сырья с использованием электро- и механической обработки активирует протеолитические изменения, повышая нежность и влагосвязывающую способность белков.