Этот метод основан на способности растворов крахмала отклонять плоскость поляризации света. В качестве растворителя крахмала применяется насыщенный раствор хлорида кальция, который не разлагает пентозаны и белки, благодаря чему повышается точность определения.
Техника определения следующая. Для удаления мешающих оптически активных веществ навеску муки 2,000 г смешивают в конической широкогорлой колбе вместимостью 100 мл с 50 мл водно-спиртового раствора хлористой ртути. Содержимое колбы сильно встряхивают в течение 3 мин, а затем фильтруют под слабым вакуумом через два бумажных фильтра диаметром 9 см. Фильтры складывают под углом 60° и так размещают на поверхности воронки, чтобы везде было 4 слоя фильтра. Осадок на фильтре 5-кратно промывают водно-спиртовым раствором хлористой ртути ( по 5 мл на каждое промывание) и растворитель отсасывают насухо.
Затем внутренний фильтр вместе с осадком переносят в колбу вместимостью 300 мл, тщательно измельчают двумя стеклянными палочками, добавляют 60 мл насыщенного раствора хлорида кальция и 2 мл 1,6%-ного раствора уксусной кислоты (для ускорения фильтрации). Содержимое колбы тщательно перемешивают и нагревают до кипения в течение 5—6 мин. Во время нагревания жидкость с осадком перемешивают стеклянной палочкой. Жидкость кипятят в течение 15 мин, при этом тщательно следят за тем, чтобы кипение было равномерным и чтобы при перемешивании крупинки не осаждались на стенках колбы выше уровня жидкости, иначе крахмал растворится не полностью.
После кипячения содержимое колбы в горячем состоянии переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и охлаждают до 20° С. Круглодонную колбу ополаскивают дистиллированной водой, сливая промывные воды в реакционную смесь. Затем добавляют 1 мл 30%-ного раствора сульфата цинка и 1 мл 15%-ного раствора гексацианоферрата (II) калия для осаждения белков и пигментов. Смесь при 20° С доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают и фильтруют в сухую колбу. Первые 20 мл фильтрата выливают. Прозрачный фильтрате температурой 20° С наливают в трубку длиной 200 мм и поляризуют. Осветленный раствор оставлять надолго нельзя, так как переходящие в коллоидное состояние жиры вызывают его помутнение. Содержание крахмала К, %, находят по таблицам или вычисляют по формуле
К = Р • 100 • 100 • 0,3462/(203pl),
где Р — показание сахариметра; 0,3462—коэффициент пересчета линейной шкалы сахариметра на круговую; 203 — удельное вращение пшеничного крахмала по круговой шкале; р— навеска муки, г; I— длина поляриметрической трубки, дм.
При навеске р = 2,0 г и длине трубки l = 2дм формула примет следующий вид:
К = Р • 100 • 100 • 0,3462/(203 • 2 • 2) = 4.271Р.
Реактивы.
- Насыщенный раствор хлорида кальция — 560 г СаС12, или 750 г СаС12 • 2НгО, или 1100 г СаС12 • 6Н2О растворяют в дистиллированной воде с температурой 50 — 60° С, охлаждают до 20° С и доводят до 1 л. Относительная плотность его должна быть 1,300.
- 1,6%-ный раствор уксусной кислоты — 1,7 мл 96%- ной ледяной уксусной кислоты доводят дистиллированной водой до 100 мл.
- 30%-ный раствор сульфата цинка — ZnS04 7Н20.
- 15%-ный раствор гексацианоферрата (II) калия (желтой кровяной соли) —К4 [Fe(CN)e] ЗН20.
- Водно-спиртовой раствор хлористой ртути — 1 г хлористой ртути растворяют в 900 мл воды, после чего добавляют 100 мл 95%-ного этанола и тщательно смешивают.