Тонкослойная хроматография отличается от бу­мажной тем, что раствор разделяемых веществ пропускают через тонко измельченное и активированное вещество (адсорбент), нанесенное тонким слоем на пластинку.

Способы тонкослойной хроматографии отличаются по применяемым сорбенту, растворителю, методу нанесения материала ит. д. В качестве сорбента чаще всего применяют силикагель или используют хроматографические пласти­ны типа «силуфол» или другие.

Силикагель в гранулах размельчают, фракционируют методом седиментации и используют фракцию с размером частиц 100—70 мм. Для освобождения от ионов железа си­ликагель обрабатывают водным раствором соляной кислоты в соотношении 1:1, промывают дистиллированной водой до отрицательной реакции на ион хлора, затем промывают уксусной кислотой и снова водой до нейтральной реакции. После этого промывают двумя порциями метанола при температ уре кипения 64,7° С. Пары метанола удаляют, а силикагель активизируют, нагревая его 4 ч при 120° С.

В качестве пластинок удобно использовать стеклянные фотопласт инки. Для приготовления сорбционной массы для одной пластинки размером 18 X 24 см берут 5,0 г силикагеля, 0,26 г гипса, 10 мл воды и все быстро смешивают в фарфоровой ступке до получения однородной массы. Полученную массу накатывают на пластинку ровным слоем с помощью стеклянной палочки или специального устрой­ства для нанесения адсорбента. Пластинки подсушивают на воздухе, а перед использованием их активизируют в су­шильном шкафу 30 мин при 100—120° С.

Вытяжку кислот полуфабрикатов и хлеба подготовляют так же, как при анализе кислот бумажной хромотографией (см. с. 109). На хроматографическую пластинку размером 9 X 12 см, покрытую силикагелем или другим адсорбен­том, наносят микрокапилляром водные растворы чистых органических кислот и испытуемые вытяжки. Количество кислот в нанесенном объеме должно составлять 0,05— 0,30 мг.

Хроматографирование ведут в системе растворителей н-бутанол, муравьиная кислота (85%-ная), вода в соотно­шении 24 : 8 : 4 на слое, обработанном парами аммиака. Разгонку ведут около 2 ч, затем пластины проветривают для удаления муравьиной кислоты и опрыскивают 0,05%- ным раствором морина в метаноле. Пятна кислот обнару­живают в ультрафиолетовом свете.

Значение коэффициента распределения R_f некоторых органических кислот, полученных при указанных условиях разгонки, следующие: лимонной — 0,58; яблочной — 0,67; щавелевой — 0,36, глюконовой — 0,44, цис-акотиновой — 0,78, винной — 0,47, молочной — 0,76, маниловой — 0,50, глутаровой — 0,86, триоксиглутаровой — 0,64, штаконо- вой — 0,80, фумаровой — 0,90, янтарной — 0,53.

Количественный состав кислот определяют следующим образом, используя при этом зависимость площади поверх­ности пятна на хроматограмме от количества кислоты в пробе. На пластинку наносят пробы чистой кислоты с из­вестным ее содержанием. Для измерения площади пятен хроматограммы переводят на кальку, которую затем накладывают на миллиметровую бумагу. Зная площадь поверхности пятна кислоты А, мм², и количество кислоты в пробе К, мкг, строят градуировочный график в системе координат √А, lgK, по которому находят содержание кислоты в пробе

Содержание α-кетокислот в сырье, полуфабрикатах и хлебе можно определить по способу Н. М. Белецкой и др.

Реактивы. 1. Водный раствор соляной кислоты 1 : 1. 2. Уксусная кислота. 3. Метанол. 4. н-бутанол. 5. 85%-ная муравьиная кислота. 6. 0,05%-ный раствор морина в ме­таноле.