Карбонильные соединения, содержащиеся в хлебе, играют первостепенную роль в формировании аромата хлеба. Они способны образовать с бисульфитом продукты присоединения (аддукты) по реакции
Это их свойство положено в основу широко применяемого метода оценки аромата хлеба, разработанного Р. Р. Токаревой и В. Л. Кретовичем.
Метод состоит в предварительном удалении непрореагировавшего бисульфита йодом, последующем разрушений аддуктов с помощью бикарбоната натрия и титровании бисульфита, высвободившегося при этом в количестве, эквивалентном содержанию карбонильных соединений.
На результаты определения карбонильных соединений по указанному методу при разрушении бисульфиткарбонильных соединений бикарбонатом натрия влияет pH раствора. При низкой щелочности раствора (pH < 8) конечная точка титрования недостаточно четкая. В сильно щелочной среде (pH > 9) йод взаимодействует со щелочью с образованием гипойодита, что лишает возможности фиксировать конец титрования в присутствии крахмала как индикатора.
По модифицированной методике КТИПП с целью улучшения условий определения бисульфитс,вязывающих веществ взамен бикарбоната натрия использован щелочноборатный раствор.
Методика определения следующая. 20 г исследуемого мякиша или верхней корки хлеба тщательно размешивают в ступке с 0,15%-ным раствором бисульфита, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доливают до метки раствором бисульфита натрия. Содержание колбы взбалтывают в течение 10 мин для извлечения карбонильных соединений в раствор и оставляют на 10 мин для оседания хлебного остатка и завершения реакции образования бисульфиткарбонильных соединений. Отделяют хлебный остаток фильтрованием или центрифугированием.
20—25 мл фильтрата или центрифугата (для сильно окрашенных растворов 10 мл и 10—15 мл воды) переносят пипеткой в коническую колбу вместимостью на 250—300 мл и прибавляют 1 мл 1 %-ного раствора крахмала.
Избыток бисульфита окисляют сначала 0,1 н., а затем 0,01 н. раствором йода до слабого фиолетово-голубого окрашивания. Если йода прибавлено больше, чем необходимо, то его удаляют прибавлением по каплям 0,01 н. раствора тиосульфата натрия.
Для разрушения бисульфиткарбонильных соединений и доведения pH до 8,3 в колбу прибавляют 25 мл щелочно- боратного раствора и тотчас же титруют из микробюретки выделившийся бисульфит 0,01 н. раствором йода до фиолетово-синей окраски раствора, которая не исчезает при перемешивании в течение 15 с. Фиксируют объем 0,01 н. раствора йода, пошедшего на титрование. После удаления остатка бисульфита прибавлением 0,1 и. раствора йода к титруемому раствору прибавляют 90-—95% объема 0,01 н. раствора йода, пошедшего на предварительное титрование, затем 25 мл щелочно-боратного раствора и дотитровывают раствор 0,01 н. раствором йода до появления фиолетово-синей окраски, не исчезающей при перемешивании 15 с. Из полученных результатов титрования вычитают данные глухого опыта.
Содержание бисульфитсвязывающих веществ X, мг- экв, на 100 г СВ, вычисляют по формуле
X = V1NV2 • 100 • 100/[V3 •p(100 — W)],
где V1 — объем 0,01 н. раствора йода, затраченного на финальное титрование, мл; N — нормальность раствора йода, равная 0,01; V2— объем мерной колбы, в которой помещена навеска хлеба, мл; V3— объем взятой для титрования водно-бисульфитной вытяжки хлеба, мл; р — навеска хлеба, г; W — влажность хлеба, %.
Воспроизводимость методики 3,1—6,6%.
Учитывая, что бисульфит натрия (NaHSOs) в твердом виде не существует и готовят его из дефицитного реактива метабисульфита (Na2S206), для этих целей рекомендуется использовать более доступный реактив — сульфит натрия (Na2S03). Подкисленный раствор сульфита аналогично водному раствору метабисульфита представляет собой бисульфит.
Реактивы.
- 0,15%-ный раствор бисульфита, 0,75 г безводного сульфита натрия (Na2S03) растворяют в 400 мл воды, подкисляют 2 и. раствором уксусной кислоты в присутствии трех — пяти капель метилрота до появления розовой окраски и затем доливают водой до 500 мл. Хранят несколько суток в склянках с хорошо притертыми пробками.
- Щелочно-боратный раствор — 30 г борной кислоты и 5 г гидроксида натрия растворяют в 1 л воды.
- 0,1 н. раствор йода готовят приближенно, 0,01 н. — из фиксанала или путем стандартизации по 0,01 н. раствора тиосульфата.
- 1%-ный раствор крахмала готовят на насыщенном растворе хлористого натрия.