При анализе органических кислот возникают затруднения, связанные с их извлечением из объектов и последующей очисткой от сопутствующих примесей. Особенно важна тщательность очистки при хроматографических методах анализа.
Распространенным методом выделения органических кислот является многократное экстрагирование их водой с применением взбалтывания и 24-часового настаивания. Для очистки экстрактов от водорастворимых примесей их пропускают через ионообменные смолы, в результате чего часть кислот теряется при очистке.
Р. Г. Рахманкуловой с соавторами применен способ извлечения кислот и их концентрирование, основанный на использовании в качестве экстрагента изопропанола. Этот способ позволяет обнаружить больший набор кислот, чем при экстрагировании водой и очистке на смолах.
Ход определения следующий. 20 г мякиша тщательно растирают в фарфоровой ступке с 50 мл изопропанола. Полученную суспензию количественно переносят в коническую колбу и встряхивают 15 мин. После отстаивания спиртовой экстракт кислот сливают через бумажный фильтр в фарфоровую чашку диаметром 100 мм. Остаток мякиша в колбе еще раз заливают 20 мл изопропанола, встряхивают, отстаивают и фильтруют. Такую экстракцию проводят 15 раз — до полного отсутствия кислот в контрольной пробе. Наличие их проверяют титрованием каждой порции экстракта 0,1 н. раствором гидроксида натрия. При отсутвии кислот связанные кислоты экстрагируют еще 5 раз изопропанолом, нагретым до 78—80° С. Это экстрагирование производят подкисленным изопропанолом, для чего к 20 мл изопропанола добавляют 0,3 мл 5%-ной ортофосфорной кислоты. Полученные экстракты выпаривают в потоке воздуха комнатной температуры и растворяют в 5 мл дистиллированной воды. Полученный раствор используют для дальнейших анализов.
При проведении анализа на хроматографе «Цвет» с пламенно-ионизационным детектором используют колонку длиной 2 м, твердый носитель-хромосорб W (60—80 меш.), неподвижная фаза — полиэтиленгликольадипат в количестве 15% от массы твердого носителя, температура хроматографической колонки 120° С, расход азота — 50 мл/мин.
Летучие кислоты идентифицируют сравнением продолжительности удерживания компонентов исследуемого образца с контрольными эталонами хроматографически чистых кислот. Количественное содержание кислот определяют по предварительно построенной калибровочной кривой.