• 8.3.1. Моноклональные антитела

Еще до разработки технологии гибридом, позволившей полу­чать гомогенные антитела, большое влияние на развитие кли­нической медицины оказали «обычные» антитела. Отметим, что наработка подходящих антител всегда осложнялась непредска­зуемостью иммунного ответа, и их титр, как и перекрестные ре­акции, варьировали от животного к животному и от одной пар­тии сыворотки к другой. Это определялось тем, что данный ан­тиген вызывает образование целого набора антител. В основу метода получения практически неограниченного количества го­могенных антител, которые находят самое широкое применение, легла фундаментальная работа Кёлера и Мильштейна, выпол­ненная в начале 70-х г. Рассмотрим несколько примеров.

Иммунологический анализ

Разработка Ялоу и Берсоном метода радиоиммунологического анализа (РИА) оказала глубочайшее влияние на многие обла­сти клинической медицины и науку вообще. Он позволяет оп­ределять очень небольшие количества вещества путем вытес­нения меченного радиоактивным изотопом антигена из комп­лекса со специфическим антителом при добавлении все возра­стающего количества немеченого испытуемого или стандартно­го антигена. Особенно ярко достоинства метода проявились в эндокринологии, так как «рабочая» концентрация гормонов обычно очень невелика, а определение их при помощи биологи­ческих методов анализа — долгая, утомительная, иногда попро­сту неосуществимая процедура. Анализируемые вещества бы­вают нестабильны даже вне условий анализа, а при анализе их нередко приходится концентрировать; кроме того, они со­держат примеси, которые могут обладать биологической ак­тивностью, сходной с таковой у изучаемого гормона. Так, ин­сулиноподобные факторы роста, соматомедины, можно опреде­лять биологическими методами, но они не инактивируются ан­тисыворотками против инсулина. Приведем лишь один пример гормона, определение которого с помощью радиоиммунологиче- ского анализа открыло принципиально новые возможности: это пролактин. Применяя быстрый и относительно простой способ его определения при помощи РИА в плазме большого числа пациентов и здоровых добровольцев, удалось установить, что повышенное содержание пролактина в плазме ассоциировано с наличием наиболее распространенного типа опухолей перед­него отдела гипофиза (пролактиномы), а нередко и с индуци­руемыми пролактином галактореей и аменореей (отсутствием менструаций), а также иными нарушениями менструального цикла. Сегодня определение содержания пролактина стало важной частью исследований бесплодия и аменореи. Приблизи­тельно у 20% женщин с аменореей обнаруживается повышен­ное содержание пролактина в плазме, причиной которого мо- жеть быть опухоль гипофиза, прием лекарств, вызывающих повышение уровня пролактина, и т. д.

Моноклональные антитела уже используются в коммерчес ских наборах для проведения радиоиммунологического анали­за, и их доступность позволила предложить альтернативные методы анализа, когда используется избыток меченых антител (иммунорадиометрический анализ). Эти методы иногда обла­дают большей чувствительностью.

Иммуногистохимия

Меченые антитела могут использоваться для изучения распре­деления антигенов в срезах тканей с помощью как светового, так и электронного микроскопа. При работе по общепринятому «сэндвич-методу» на срез наносят немеченые специфические антитела, отмывают их избыток, а затем добавляют антитело против иммуноглобулина (обычно несущее флуоресцентную метку или связанное с ферментом). Таким образом осуществ­ляется непрямое мечение изучаемого антигена. В биологиче­ских исследованиях и в медицине применение этого метода ока­залось исключительно плодотворным. Одним из примеров ис­пользования обычных поликлональных антисывороток может быть топографическое картирование различных типов клеток в тканях, например островков Лангерганса. Иммуногистохими­ческие опыты с применением различных антисывороток пока­зали, что содержащие инсулин В-клетки располагаются в цент­ральной части островков, а секретирующие глюкагон А-клет- ки — на их периферии. На стыке двух слоев располагаются D-клетки, образующие соматостатин. Возможно, такое взаимо­расположение клеток имеет функциональное значение.

Примером современного метода использования монокло­нальных антител для гистопатологической диагностики заболе­ваний человека может быть анализ биоптатов (образцов тка­ни) лимфатических узлов как способ определения типа опухо­лей лимфатической системы (например, болезни Ходжкина, различных лимфом и др.).

Методы иммуногистохимии находят также применение в диагностике для определения природы клеток, давших начало опухоли, по типу содержащегося в них антигена.

Типирование подлежащих пересадке тканей

Гуморальные и клеточные реакции, ответственные за оттор­жение тканей и органов при межвидовой их пересадке или же при пересадке пациенту, не состоящему в родстве с донором, направлены в основном против так называемых антигенов ги­стосовместимости, расположенных на поверхности клеток. Впервые эти белки были открыты при изучении антигенов лей­коцитов человека (HLA). Кодирующие их гены расположены на 6-й хромосоме. Эти поверхностные маркеры играют ключе­вую роль в узнавании организмом «своих» и «чужих» клеток. Предварительный подбор HLA-гаплотипов донора и реципиента существенно улучшил результаты операций по пересадке орга­нов. Четыре из пяти главных локусов (А, В, C и Dr) комплек­са генов HLA (рис. 8.2) кодируют серологически определенные антигены, т. е. типируемые при помощи антител. В отличие от них локус D отвечает за пролиферативный ответ культуры при смешивании лимфоцитов, хотя он может быть таким же, как в случае локуса Dr. Гены каждого локуса исключительно поли­морфны: одному антигену соответствует до тридцати аллелей. Типирование HLA-комплекса у пациентов можно существенно улучшить путем применения моноклональных антител против различных антигенов комплекса HLA, так как это повышает надежность и воспроизводимость результатов.

Рис. 8.2. Основные локусы HLA (А, В, С, D и Dr) на 6-й хромосоме. Гипоте­тический ген иммунного ответа Dr, видимо, близок к локусу D. Связь между HLA и подверженностью определенным заболеваниям может опосредоваться именно этим локусом.

Антигены HLA связаны также с некоторыми заболевания­ми. Изучение частоты встречаемости их у населения позволило выявить, что некоторые болезни возникают чаще в группах с определенными специфическими гаплотипами HLA. Так, сте­пень риска возникновения целиакии составляет около 73 для гаплотипа D3, а ревматоидного артрита — 4 для D4, т. е. эти заболевания встречаются соответственно в 73 или 4 раза чаще у лиц, обладающих этими антигенами, чем у тех, кто этих ан­тигенов не имеет. Таким образом, HLA-типирование позволяет оценить вероятность возникновения определенного заболевания в конкретной популяции и способствует осуществлению мер по идентификации и предотвращению болезней (там, где такие ме­ры предпринимаются).

Диагностика злокачественных новообразований
и наблюдение за ними

Известны несколько специфических опухолевых маркеров, ко­торые с успехом используются в диагностике, прогнозировании и выявлении распространения опухолей (т. е. метастазов). Не­которые из них обнаруживаются в крови (обычно с помощью метода радиоиммунологического анализа), а другие находят в препаратах опухолей. Так, а-фетопротеин является главным белком сыворотки плода; его содержание уменьшается в те­чение первого года жизни. Определяя содержание a-фетопро­теина в плазме при помощи метода РИА, удалось установить, что оно повышается у многих больных с гепатомой (рак пече­ни) и при раке семенников (тератоме). У многих больных, страдающих раком прямой кишки, в плазме отмечается повы­шенное содержание карциноэмбрионального антигена. Дальней­шее его увеличение может служить указанием на неэффектив­ность химио- или лучевой терапии.

Помимо того что моноклональные антитела применяются как специфические реагенты в стандартных тестах, они могут использоваться и для идентификации новых, более специфиче­ских маркеров опухолей. Так, Ритсу и его сотр. (Ritz et al., 1980) удалось получить моноклональные антитела к антигену клеток при остром лимфолейкозе человека. Были также выде­лены гомогенные антитела к клеткам злокачественной мелано­мы человека (одна из разновидностей рака кожи), которые не давали перекрестной реакции с нормальными клетками кожи. Введение радиоактивных и флуоресцентных меток в опухоле­специфичные антитела, вероятно, облегчит выявление метаста­зов и оценку первичных реакций опухолей в ходе лечения как in vivo, так и при анализе препаратов, полученных при биоп­сии. Развитию новых способов лечения (см. далее) может спо­собствовать направленное введение лекарственных препаратов, присоединенных к антителам против данных опухолей.

Направленное введение лекарственных препаратов

Моноклональные антитела могут найти применение для вве­дения лекарственных веществ и токсинов в определенную часть тела (например, опухоль) либо путем их непосредственного присоединения к таким веществам, либо путем связывания с поверхностью липосом, содержащих внутри такие вещества.

Были получены комплексы антител к поверхностным анти­генам раковых клеток со многими неспецифичными противора­ковыми средствами, но далеко не всегда они оказывались эф­фективными. Вероятно, наиболее многообещающим является использование сильнодействующих растительных и бактериаль­ных токсинов, одна молекула которых, как принято считать, может вызвать гибель клетки. Молекулы токсина дифтерии и рицина образованы двумя полипептидными цепями, связанны­ми дисульфидными мостиками. Цепь В связывается с клеточ­ной поверхностью, а цепь А, обладающая ферментативной ак­тивностью, проникает внутрь клетки и нарушает работу ме­ханизма биосинтеза белка. Были предприняты попытки заме­нить В-цепь токсинов специфическими антителами, преимуще­ственно гомогенными. Недавно был получен препарат моно­клональных антител к антигену раковых клеток прямой кишки, ассоциированных с A-цепью токсина, который избирательно действует на эти клетки в культуре.

Получен ассоциат липосом, содержащих метатрексат (инги­битор дигидрофолатредуктазы, противораковое средство), и мо­ноклональных антител к антигенам гистосовместимости мышей. Было показано, что он оказывает специфическое влияние на клетки селезенки. Надо сказать, что исследования по направ­ленному введению лекарственных веществ, содержащихся в липосомах, только начинаются.

Передозировка лекарств

Антитела против лекарственных препаратов, например дигокси­на, могут оказаться полезными для снятия последствий его передозировки, хотя сегодня и не ясно, нужно ли применять их экстракорпорально, связанными с твердым носителем, через; который циркулирует кровь, или же вводить в кровоток.

Получение важных для медицины веществ

Примером использования моноклональных антител для очист­ки и крупномасштабного производства важных для медицины веществ может быть работа Секера и Берке (Secher, Burke₁ 1980). Им удалось ковалентно пришить мышиное моноклональ­ное антитело против лейкоцитарного интерферона человека к. твердому носителю — сефарозе. C помощью полученного таким образом специфического иммуноадсорбента удалось за один цикл очистить в 5000 раз лимфобластоидный интерферон. Важ­ное преимущество этого способа заключается в том, что для производства антител требуется очень немного частично очи­щенного антигена, поскольку разработаны методы отбора и клонирования искомого гибрида.

• 8.3.2.   Технология рекомбинантных ДНК (см. также гл. 7)

Общеизвестно, что разработка методов изменения генетическо­го аппарата клеток, позволяющих вводить в них чужеродные гены, клонировать их, экспрессировать и получать нужные про­дукты, совершила настоящую революцию в биологии. Эти до­стижения находят самое широкое применение и в медицине. Белки и пептиды, доступные совсем недавно лишь в очень не­большом количестве, сегодня предполагается производить в массовом масштабе и использовать для лечения многих боль­ных. Вот несколько тому примеров.

Инсулин

Сегодня 1—2% населения Англии, Европы и США страдают диабетом, и приблизительно 20% этих больных не могут су­ществовать без инъекций инсулина. Со времени проведения первых опытов по использованию инсулина для лечения диабе­та в 1922 г. этот гормон выделяли из поджелудочной железы животных (коров или свиней). Существует несколько причин, по которым целесообразна разработка методов крупномасштаб­ного производства и выпуск на рынок инсулина человека: среди них и коммерческие соображения, и эмоциональные факторы, и потребности развития науки, и возможные преимущества при лечении.

Инсулин как коров, так и свиней немного отличается по аминокислотной последовательности от инсулина человека. Ocoбенно близки инсулины человека и свиньи: у последнего лишь С-концевой треонин В-цепи заменен на аланин. Инсулины ко­ровы и человека различаются по трем аминокислотным остат­кам, и именно этими различиями определяется повышенная иммуногенная активность инсулина коровы по сравнению с ин­сулином свиньи. Почти у всех больных, которых лечат обычным методом, т. е. вводят им инсулин коровы, в крови появляются антитела к инсулину. Антигенные свойства инсулина частично определяются и примесями в его препаратах. Скорее всего именно образованием антител к инсулину объясняются некото­рые незначительные побочные эффекты при инъекциях инсу­лина коровы, например атрофия подкожной жировой прослой­ки в месте повторного введения. В случае высокоочищенного инсулина свиньи эти эффекты отсутствуют. Далее, антитела к инсулину инактивируют его в кровотоке, так что больному приходится вводить большие дозы, чем это необходимо. Анти­тела, вероятно, влияют и на продолжительность биологическо­го действия введенного инсулина. Надежных данных о том, что антитела способны вызвать более долгосрочные и серьезные нарушения, нет. Можно думать, что инсулин человека будет еще менее иммуногенным, чем инсулин свиньи (это естествен­но, поскольку он не является чужеродным белком).

Так как число больных диабетом и соответственно потреб­ность в инсулине растут, то вполне возможно, что доступность его в будущем уменьшится из-за нехватки исходного сырья — поджелудочной железы животных. Столь же очевидно, что из- за чисто эмоциональных факторов лучше использовать инсулин человека, чем каких-либо животных.

Ряд производителей инсулина во главе с фирмой Eli Lilly and Со. использовали как основу для производства инсулина человека технологию рекомбинатных ДНК. Согласно схеме процесса, разработанного Eli Lilly в сотрудничестве с фирмой Genenetech Inc. (рис. 8.3), на первом этапе воссоздают последо­вательность ДНК по аминокислотной последовательности инсу­лина, раздельно синтезируя искусственные гены его А- и В-це- пей. На 5'-конце каждого из них располагается кодон метиони­на (который в синтезированном белке оказывается N-конце- вым), а на З'-конце — терминирующие последовательности. Каждый из генов встраивают затем в ген З-галактозидазы плазмид, а их в свою очередь вводят в клетки E. coli. Посколь­ку бактерии растят на среде с галактозой, а не с глюкозой, то в них индуцируется синтез З-галактозидазы, а вместе с ней — А- и В-цепей инсулина, присоединенных через остаток метиони­на. После лизиса бактерий и обработки бромцианом, который специфически расщепляет белки по остатку метионина, цепи инсулина отделяют от 3-галактозидазы (инсулин метионина не содержит). Затем проводят очистку цепей и их объединение (с низким выходом), в результате чего образуется нативный двухцепочечный инсулин. Было показано, что он не содержит белков E. coli, эндотоксинов и пирогенных веществ, по физиче­ским свойствам неотличим от инсулина из поджелудочной же­лезы человека и в тест-системе (гипогликемия у животных) проявляет полную биологическую активность.

Рис. 8.3. Получение инсулина человека на основе технологии рекомбинантных ДНК (Miller, Baxter, 1980).

Рис. 8.4. Изменение содержания глюкозы в плазме здоровых добровольцев под. действием малых и больших доз инсулина человека, полученного на основе технологии рекомбинантных ДНК, и инсулина из поджелудочной железы свиньи (Keen et al., 1980). Вверху — биологический ответ при подкожном вве­дении, внизу — при внутривенном введении в течение 1 ч.

Впоследствии был испытан альтернативный метод: синтези­ровали ген молекулы-предшественника, проинсулина, который и вводили в Е. coli. После очистки проинсулина его расщепля­ли трипсином и З-карбоксипептидазой и получали нативный инсулин.

Инсулин человека, полученный с помощью Е. coli, оказался первым «генно-инженерным» белком, испытанным на людях. В опытах со здоровыми добровольцами было установлено, что он безопасен, во всяком случае при краткосрочном применении (не вызывает аллергических и иных нежелательных реакций) и обладает практически одинаковой с инсулином свиньи спо­собностью снижать уровень глюкозы в крови при введении его под кожу или внутривенно (рис. 8.4). В настоящее время такой инсулин человека получают множество диабетиков во всем ми­ре. Этому предшествовали клинические испытания, в ходе ко­торых изучались изменения метаболизма и иммунологические эффекты. Сегодня это уже обычный метод лечения.

Интерферон

Интерфероны — это группа белков, открытых в ходе изучения веществ, вырабатываемых клетками, зараженными вирусами. ’Они индуцируют как локальные, так и системные противови­русные реакции в других клетках. Кроме того, интерфероны об­ладают еще двумя важными свойствами: подавляют пролифе­рацию клеток (и, таким образом, потенциально являются про­тивоопухолевым средством) и модулируют иммунную систему. Недавно была упорядочена классификация интерферонов. Их делят на группы, включающие по нескольку белков: а (ранее — -лейкоцитарные интерфероны), β (интерфероны фибробластов) и у (иммунные интерфероны).

До недавнего времени интерфероны были доступны лишь в небольшом количестве. Частично очищенные препараты полу­чали главным образом из лейкоцитов человека. Из-за высокой видоспецифичности для клинического применения необходимо было синтезировать именно интерферон человека, но его нель­зя было всесторонне исследовать в опытах на животных. Про­ведение должным образом спланированных и широкомасштаб­ных испытаний интерферона на больных вирусными заболева­ниями и раковых больных было затруднено, но мы уже имеем какое-то представление о потенциальных возможностях этого препарата. Так, лейкоцитарный интерферон существенно уменьшает распространение пузырьков и продолжительность их формирования, а также снимает боль у больных с одной из форм герпеса (herpes zoster, опоясывающий лишай). Гепа­тит В также поддается лечению интерфероном (см. ниже). Сре­ди онкологических больных были проведены испытания на па­циентах с метастазирующим раком молочной железы, и у две­надцати из сорока трех диаметр опухоли уменьшился по мень­шей мере на 50%. Изучалось его действие на лимфомы (иные, чем лимфома Ходжкина), остеосаркомы и злокачественные ме­ланомы. Однако здесь нужно проделать большую работу по подбору оптимальных доз, частоты и способа введения интер­ферона и выяснению эффективности комплексного лечения с применением других противоопухолевых средств. Неоднократно сообщалось о побочных эффектах (лихорадка, общее недомога­ние, потеря веса) при применении интерферона.

Понятно, что в изучении, клинических испытаниях и внед­рении интерферона в практику будет достигнут большой прогресс, если удастся получать в большом количестве чистый препарат на основе технологии рекомбинатных ДНК- Уже синтезирован ген лейкоцитарного интерферона человека длиной 514 пар нуклеотидов; его включали в плазмиду и клонирова­ли затем в Е. coll. Удалось достичь экспрессии гена интерферо­на человека в клетках дрожжей, а ген фибробластного интер­ферона был включен в Е. coll. За его экспрессией можно была проследить по образованию продукта с противовирусной ак­тивностью. Интересен сам факт проявления биологической ак­тивности, так как этот природный интерферон гликозилирован,, а получаемый по технологии рекомбинантных ДНК — нет. Производство интерферона на основе рекомбинантных ДНК освоили уже по меньшей мере две фармацевтические компании. Начались и клинические испытания этих препаратов.

Гормон роста

Гормон роста человека — это белок, состоящий из 191 амино­кислотного остатка и имеющий мол. массу 22 000. Он образу­ется и секретируется передней долей гипофиза и необходим для: роста костей. Выяснено, что у 7—10 людей на 1 млн. этот гор­мон образуется в недостаточном количестве, что приводит к за­держке роста (карликовости). Хотя это заболевание обычна врожденное, задержка роста становится заметной лишь в более позднем, детском возрасте, так как гормон не нужен для внут­риутробного развития. Строение гормона роста видоспецифич­но, и в клинике можно применять лишь гормон роста человека. До недавнего времени его получали из гипофиза трупов, но по вполне понятным причинам этот способ имеет свои ограни­чения. Фармацевтическая компания Kabi Vitrum в сотрудниче­стве с Genentech Inc. предприняла попытки наладить произ­водство гормона роста на основе технологии рекомбинантных ДНК с использованием Е. coll. Можно надеяться, что с по­мощью такого подхода мы вскоре не будем испытывать в нем недостатка. Очищенный препарат гормона из бактерий по био­логической активности подобен гормону из гипофиза. Сейчас ведутся клинические испытания: гормон роста вводят детям, страдающим от его недостатка.

Вакцины

Гепатит В — заболевание, при котором трудно получить под­ходящий антиген для иммунизации. Исход этой вирусной бо­лезни печени трудно прогнозировать, особенно у пожилых и ос­лабленных больных. Заражение происходит при переливании крови и плазмы, при использовании плохо стерилизованных шприцев, игл и других медицинских инструментов, а также при половых сношениях. К числу групп с высокой степенью риска, где может помочь вакцинация, относятся больные с синдромом приобретенного иммунодефицита, раковые больные, которым необходимо переливать кровь в большом количестве, а также лица, проводящие гемодиализ, осуществляющие транспланта­ции, персонал онкологических учреждений, наркоманы, умст­венно отсталые и обслуживающие их, проститутки и гомосек­суалисты.

Вирус гепатита В не размножается в культуре тканей. Вак­цины против него получали путем тепловой обработки сыво­ротки бессимптомных носителей. Впоследствии была предло­жена вакцина на основе инактивированных сферических части­чек его поверхностного антигена (HBsAg), присутствовавших в сыворотке носителей. Эти вакцины эффективны и безопасны, однако для их получения необходимо большое количество смешанной сыворотки, осуществление дорогостоящих защитных мер и крупные затраты на оборудование.

Альтернативным способом получения антигена может быть наработка белков вируса гепатита В клетками прокариот, ко­торый и был разработан Эдманом и др. (Edman et al., 1981). Другой подход заключается в инокуляции пептидов синтетиче­ского поверхностного антигена. Исходя из нуклеотидной после­довательности вирусного генома была реконструирована ами­нокислотная последовательность HBsAg, и многие исследова­тели попытались с помощью ЭВМ выявить в ней антигенные последовательности. Так, Дрисману и др. (Dreesman et al., 1982) удалось синтезировать два циклических пептида, которые при одноразовом введении вызывали образование антител у мышей.

Ферменты

Ферменты составляют основу многих тестов, используемых в клинической медицине. Они все чаще применяются при авто­матизированном анализе и биохимическом скрининге жидко­стей тела, которые ведутся в биохимических лабораториях сов­ременных клиник. Примером таких ферментов могут быть глю- козооксидаза, гексокиназа, холестеролоксидаза и эстераза, уре­аза, уриказа, лактатдегидрогеназа и алкогольдегидрогеназа. Иногда ферменты применяют и в терапии (например, стрепто­киназу или урокиназу; они оказывают мощное фибринолитиче­ское действие при тяжелом тромбозе сосудов).

В будущем ферменты (скорее всего иммобилизованные) найдут, вероятно, значительно более широкое применение в составе фермент-содержащих электродов, используемых для мониторинга in vivo и in vitro. Много подобных устройств уже сконструировано, но в клинике не применяется. Так, многими учеными был разработан электрод с глюкозооксидазой. В уст­ройстве Апдайка и Хикса глюкозооксидаза наслоена непосред­ственно на поверхность обычного платинового электрода (рис. 8.5). Чем больше кислорода потребляется в реакции Глюкоза-)-Кислород=Глюконовая кислота+Перекись водорода, тем меньше количество его регистрируется внутренней частью электрода.

Платиновый катод

Рис. 8.5. Устройство ферментного электрода с глюкозооксидазой (Updike₁ Hicks₁ 1967).

К сожалению, это устройство все еще рабо­тает недостаточно надежно, что не позволяет использовать его как имплантируемый аппарат для постоянной регистрации со­держания глюкозы. Возникающие здесь проблемы связаны с наличием конкурентных отношений между глюкозой и кислоро­дом в жидкостях тела, инактивацией фермента in vivo, слож­ностью калибровки и дрейфом характеристик электрода. Веду­щиеся интенсивные исследования позволяют надеяться, что, усовершенствовав такие электроды с ферментами, удастся со временем создать датчик глюкозы для автономно работающего, полностью автоматического и небольшого по размеру протеза поджелудочной железы, нужного для лечения больных диабе­том. В этой связи особенно интересны последние достижения в области разработки фермент-содержащих электродов. Исследо­ватели, работающие в Крэнфилдском технологическом инсти­туте Оксфордского университета и в госпитале Гая в Лондоне, разрабатывают глюкозный электрод, в котором для переноса электронов от простетической группы (ФАД) глюкозооксидазы на графитовый электрод используется органический медиатор (например, ферроцен), т. е. процесс идет без участия кислоро­да, который обычно выступает в роли конечного акцептора электронов. Работа этого электрода, таким образом, не связана с кислородом. Он может оказаться особенно полезным при соз­дании имплантируемого, способного работать in vivo устройст­ва для больных диабетом.

По-видимому, основные усилия в ближайшие несколька лет будут направлены на развитие технологии биодатчиков. Ферменты (и другие лиганды, например антитела; см. разд. 8.5) могут оказаться весьма полезными для контроля за кон­центрацией (мониторинга) разнообразных веществ, интересую­щих клиницистов: промежуточных метаболитов, лекарственных: препаратов и гормонов. Свою роль сыграет здесь биотехноло­гия: она предоставит и обычные, и редкие ферменты микробов, полученные как путем крупномасштабного их выращивания, так и, возможно, с помощью технологии рекомбинантных ДНК.

В качестве примера возможного применения ферментов в терапии укажем на предложение вводить инкапсулированные в липосомах ферменты для лечения некоторых болезней, свя­занных с накоплением лизосом. Такой способ был испытан на нескольких больных болезнью Гоше, с врожденной недостаточ­ностью по глюкоцереброзид 3-глюкозидазе. Полученные резуль­таты не позволяют сделать однозначных выводов.