Качество выпеченного хлеба определяется особенностями химического состава муки, ее хлебопекарными свойствами и активностью ферментных систем муки, дрожжевых клеток и молочнокислых бактерий. Значительное влияние оказывают также условия брожения полуфабрикатов, расстойки и выпечки тестовых заготовок.
Академик А. Н. Бах указывал, что «в условиях автоматизированного хлебопекарного производства огромную роль играет знание биохимических процессов, происходящих при приготовлении теста, расстойке тестовых заготовок и их выпечке... без этих знаний невозможно рационально управлять производством».
Получить хлеб с надлежащей пористостью, объемом, цветом корки можно только в том случае, если в процессе приготовления теста гармонично сочетаются микробиологические процессы и биохимические превращения.
Важным средством совершенствования технологического процесса и улучшения качества хлеба, приготовленного из муки разного хлебопекарного достоинства, служат ферментные препараты.
В настоящее время в хлебопекарном производстве применяются препараты амилолитических, протеолитических, липолитических и окислительно-восстановительных ферментов (табл. 15.3).
Амилолитические ферментные препараты. Это основная группа ферментных препаратов, применяемых для интенсификации процесса приготовления теста и улучшения качества хлеба.
Следует повторить, что сахарообразующая способность муки обусловлена действием амилолитических ферментов муки на ее крахмал и зависит как от активности амилолитических ферментов, так и от размеров, характера и состояния частиц муки и крахмальных зерен в этих частицах.
Содержание β-амилазы в муке из зерна пшеницы более чем достаточно. Поэтому сахарообразующая способность пшеничной муки из нормального непроросшего зерна обычно обусловливается не количеством β-амилазы, а доступностью и податливостью крахмала муки действию ферментов. Однако добавление α-амилазы в несколько раз увеличивает сахарообразующую способность муки. Это объясняется тем, что α-амилаза гидролизует крахмал в основном на низкомолекулярные декстрины, очень легко переводимые β-амилазой муки в мальтозу. Ведущую роль в предотвращении черствения хлебобулочных изделий играют α-амилазы, расщепляющие крахмал до декстринов. Последние препятствуют ретроградации крахмала, его кристаллизации и связанному с этим изменению структуры хлеба, вызванному его черствением. В настоящее время для увеличения объема хлеба, продления срока его хранения, улучшения цвета корки и аромата применяют α-амилазы, которые могут иметь как растительное происхождение — образовываться в проросшем зерне (солоде), так и микробное — синтезироваться бактериями или грибами. Для бактериальной а-амилазы рН-оптимум находится в пределах рН 5,8-6,0, для грибной — рН 4,8-5,8, для солодовой — рН 4,7-5,4. При рН ниже 4,0 происходит почти полная инактивация бактериальной α-амилазы, что необходимо учитывать, применяя данный фермент при приготовлении заквашенных заварок, жидких дрожжей, ржаных и ржано-пшеничных полуфабрикатов, конечная кислотность которых приближается к рН 4,0.
Использование грибной α-амилазы увеличивает объем изделий, усиливает аромат хлеба из смеси пшеничной и ржаной муки. Однако грибная а-амилаза обладает более низкой термостабильностью, чем бактериальная. Она инактивируется уже при 63-71°С.
Термостабильная бактериальная α-амилаза сохраняет свою активность в интервале температур 80-110°С. Ее действие проявляется на протяжении всего процесса приготовления хлеба; она может применяться как для увеличения сахарообразующей способности в тесте, так и для предотвращения ретроградации крахмала, ведущей к черствению хлеба. Благодаря своей высокой термостабильности бактериальная а-амилаза сохраняет активность вплоть до охлаждения хлеба. При этом в результате избыточного накопления в тесте растворимых декстринов мякиш хлеба приобретает некоторую липкость.
Данного недостатка лишена мальтогенная амилаза, являющаяся изоферментом а-амилазы. Мальтогенная а-амилаза проросшего зерна образует смесь сахаров, содержащую 87% мальтозы и 13% глюкозы. Бактериальная мальтогенная α-амилаза гидролизует крахмал с образованием в основном мальтозы и небольшого количества мальтодекстринов со степенью полимеризации 1-6. Активность этой амилазы проявляется при температуре, соответствующей процессам клейстеризации крахмала, и резко снижается при температуре ниже 35°С. Хлеб, полученный с применением этой амилазы, черствеет позже, чем хлеб, в котором использовали немальтогенные бактериальные амилазы.
Наибольшая эффективность от внесения ферментных препаратов с амилолитической активностью достигается при использовании муки с пониженной сахарообразующей способностью, автолитической активностью до 30%, с недостаточно эластичной, малорастяжимой клейковиной. В случаях, когда мука имеет слабую, излишне растяжимую клейковину, амилолитические препараты целесообразно применять одновременно с аскорбиновой кислотой или с другими улучшителями окислительного действия. Препараты с амилолитической активностью используются при получении пшеничного и ржаного хлеба. Их добавляют в заварки при приготовлении жидких дрожжей, а также в ржаные закваски, опару и тесто. Наиболее широко в технологии хлеба применяют амилолитические препараты микробного происхождения. Амилоризин П10х и Амилосубтилин Г10х — амилолитические препараты с активной а-амилазой. Применяются также неферментированный солод и солодовые экстракты с активной а-ами- лазой, которые вырабатываются из проросшего зерна ржи, ячменя или тритикале.
Амилоризин П10х. Основной препарат, широко используемый в хлебопекарной отрасли, ферменты которого продуцирует плесневый гриб Aspergillus oryzae, штамм 476-И.
В состав этого комплекса входят ферменты амилолитического и протеолитического действия, наибольшее значение из которых имеет а-амилаза, катализирующая гидролиз крахмала до декстринов с разной молекулярной массой и некоторого количества мальтозы, а также эндо- и экзопротеазы, катализирующие расщепление высокомолекулярных белков до пептидов и аминокислот.
В соответствии с нормативной документацией ферментный препарат Амилоризин П10х должен удовлетворять следующим требованиям:
- амилолитическая (декстринирующая) способность АС (ДС) — не менее 2000 ед. на 1 г воздушно-сухого препарата;
- осахаривающая способность (ОС) — не менее 150 ед. на 1 г;
- протеолитическая способность (ПС) — не более 7 ед. на 1 г воздушно-сухого препарата.
Для хлебопекарной промышленности особенно большое значение имеет степень обсемененности препарата спорами Bacillus mesentericus (картофельная палочка) и Bacillus subtilis (сенная палочка), количество которых не должно превышать 1105. Поэтому на хлебопекарных предприятиях при выработке хлеба из пшеничной муки с добавлением ферментных препаратов перед пуском их в производство каждую партию препарата проверяют на обсемененность спорами картофельной палочки, проводя пробную лабораторную выпечку по ГОСТ 27669-88 «Мука пшеничная. Методы пробной лабораторной выпечки хлеба».
Стандартизация ферментного препарата обеспечивается наполнителями. В качестве эффективного наполнителя, оказывающего стабилизирующее действие на ферментные препараты, применяется сульфат аммония (NH4)2SO4 в сочетании с крахмалом (1: 1). Активность амилаз и протеаз в течение года практически не изменяется. При использовании ферментных препаратов возможно снижение расхода жидких дрожжей до 20% к массе муки, так как при их внесении улучшаются бродильная активность, подъемная сила дрожжевых клеток. Биохимические превращения под действием ферментов протекают практически на всех стадиях технологического процесса приготовления хлебобулочных изделий.
Для получения хлеба нормального качества большое значение имеет не только процесс газообразования, но и его динамика. При наличии в муке активной р-амилазы газообразование в процессе приготовления теста идет по возрастающей кривой, максимум которой приходится на 4-й час брожения. Такой ход процесса газообразования полностью обеспечивает выполнение требований нормативной документации к качеству изделий и роль β-амилазы муки здесь определена.
Претерпевает изменения и белковый комплекс. Реакции, протекающие с участием ферментов, оказывают большое влияние на качество полуфабрикатов и изделий, поэтому необходимо регулировать их интенсивность. В качестве биологического улучшителя при приготовлении питательных смесей для жидких дрожжей, для активирования прессованных дрожжей, а также при выпечке специальных видов хлеба, например, рижского и др., широко применяются неферментированный солод и солодовые препараты.
Однако кроме активной α-амилазы в неферментированном солоде содержатся активные протеолитические ферменты, поэтому при переработке муки со средними хлебопекарными достоинствами следует очень осторожно подходить к подбору дозировки неферментированного солода и солодовых препаратов. С этой точки зрения использование ферментных препаратов со стабильной нормированной амилолитической и протеолитической активностями предпочтительнее (легче рассчитать дозировку).
При переработке муки пониженного хлебопекарного достоинства, полученной из проросшего зерна, подвергнутого затем сушке при высокой температуре, рекомендуется интенсифицировать процессы брожения, что может быть достигнуто путем увеличения дозировки прессованных дрожжей или применения жидких дрожжей. Наиболее эффективно использование ферментных препаратов.
Амилосубтилин Г10х представляет собой очищенный бактериальный ферментный препарат, продуцируемый Bacillus subtilis. Препарат содержит а-амилазу, р-глюка- назу и протеазу. Оптимальные условия действия препарата: рН 6,0-6,3 и температура 50-55°С. Стандартный препарат должен обладать амилолитической активностью не менее 3000 ед./г и протеолитической не более 2 ед./г.
Амилоризин П10х и Амилосубтилин Г10х, Г20х оказывают наиболее эффективное действие при добавлении к муке с упругой, недостаточно эластичной клеиковинои, с пониженной или нормальной сахарообразующей способностью (180-250 мг мальтозы на 10 г муки) и автолитической активностью до 30%.
Зарубежными фирмами также выпускаются ферментные препараты, обладающие амилолитической активностью. Аналогом Амилоризина П10х может служить препарат Fungamyl BG (фирма Novozymes A/S, Дания), приготовленный на основе очищенной грибной амилазы (оптимальны рН 5,8-6,0 и температура — 54-76°С), который вносят в дозировке 0,2-1,0 г на 100 г муки.
Препарат Novamyl (фирма Novozymes A/S, Дания) содержит мальтогенную амилазу бактериального происхождения и проявляет максимальную активность в первой зоне выпечки тестовых заготовок (оптимумы рН 5,8-6,0 и температуры — 54-76°С). Он способствует накоплению мальтозы и декстринов, клейстеризации крахмала и замедлению его ретроградации при хранении хлеба. Novamyl может применяться при производстве изделий из цельносмолотого зерна. При хранении в полиэтиленовых пакетах хлеб, полученный с применением Novamyl, сохраняет свежесть в течение 72 ч.
Для коррекции сахаро- и газообразующей способности муки, улучшения структуры мякиша, повышения объема хлебобулочных изделий и продления срока сохранения их свежести применяют ферментные препараты Grin- darmyl 100, Grindarmyl Super AX (фирма Danisco, Дания).
Препараты Biobake 2000, Grindamyl MAX-LIFE U4, Grindamyl MAX-LIFE Е5 и Novamyl предназначены для удлинения срока сохранения свежести хлеба.
Препарат Grindamyl MAX-LIFE U4 — ферментный комплекс, состоящий из грибной и бактериальной амилаз, применяется для замедления черствения хлебобулочных изделий, вырабатываемых опарными способами. Кроме того, добавление ферментного препарата Grindamyl MAX-LIFE U4 приводит к улучшению показателя стабильности теста. Препарат Grindamyl MAX-LIFE E5 грибного происхождения целесообразно применять при ускоренных технологиях.
Ферментные препараты с активной глюкоамилазой.
Помимо амилолитических ферментных препаратов в технологии хлеба применяются глюкоамилазные ферментные препараты. Глюкоамилаза гидролизует до глюкозы декстрины, образующиеся под действием α-амилаз. Действуя с нередуцирующих концов молекулы амилозы или амилопектина, глюкоамилаза отщепляет молекулу глюкозы. Фермент расщепляет а-1,4-глюкозидные связи. Амилоза и амилопектин полностью превращаются в глюкозу. Теоретически из 100 г крахмала можно получить 111 г глюкозы. Однако, как правило, гидролиз крахмала, особенно в высококонцентрированных растворах субстрата, не идет до конца. Препараты глюкоамилазы часто содержат активную трансгликозилазу, которая катализирует синтез негидролизуемых олигосахаридов с а-1,6-глюко- зидными связями. Действие трансгликозилазы особенно сильно возрастает при повышении концентрации крахмала и продуктов его гидролиза.
В нашей стране нашли применение следующие препараты с активной глюкоамилазой — Глюкоамилаза очищенная (ТУ 64-13-18-88) и Глюкоаваморин Г10х, Г20х.
В ФГБОУ ВПО ВГУИТ селекционирован штамм Rhi- zopus delemar В, который служит продуцентом препарата Глюкоделемарин П10х.
Глюкоаваморин Г10х, Г20х (продуцент Aspergillus awa- mori). Гриб Aspergillus awamori продуцирует менее активную, чем Aspergillus oryzae α-амилазу, но в то же время более активную олиго-1,6-глюкозидазу и глюкоамилазу. Глюкоамилаза, действуя на крахмал, гидролизует а-1,4- глюкановые связи, последовательно отщепляя остатки глюкозы от нередуцирующих концов крахмальных цепей; декстрины не образуются. Более того, декстрины, образующиеся в тесте при действии α-амилазы, будут гидролизоваться глюкоамилазой в глюкозу.
При применении Глюкоаваморина Г10х пористость мякиша изделий увеличивается, улучшаются вкус и аромат. Наилучший результат достигается при совместном внесении препарата с глюкозооксидазой и аскорбиновой кислотой. Глюкоаваморин Г10х находит применение при производстве высокоосахаренных ферментативных полуфабрикатов и жидких дрожжей.
Для получения гидролизатов пшеничной муки рекомендуется применение двух ферментных препаратов: Ами- лосубтилин Г10х — для разжижения мучной суспензии в процессе заваривания крахмалсодержащего компонента и Глюкоделемарин П10х — для его осахаривания после полной декстринизации. При применении Глюкоавамо- рина Г10х высокоосахаренные гидролизаты содержат до 88% глюкозы. При их применении возможна полная замена сахара-песка в городских булках и нарезных батонах. Степень осахаривания можно повысить до 97%, применяя после декстринизации крахмала ферментный препарат Глюкоделемарин П10х. Этот эффект обусловлен отсутствием трансгликозилазных ферментов в ферментном препарате Глюкоделемарин П10х. В условиях высококонцентрированных крахмальных суспензий (при гидромодуле 1: 1) вследствие защитного действия крахмала на глюкоамилазу и отсутствия трансгликозилаз, препарат Глюкоделемарин П10х (продуцент Rhizopus delemarB) осуществляет более глубокий гидролиз крахмала как при температуре 30°С (рис. 15.4, 15.5), так и при температуре 58°С, чем препарат Глюкоаваморин Г10х (продуцент Aspergillus awamori). Максимальная активность фермента проявляется при 55-58°С и рН 4,5-5,0.
При гидролизе крахмала глюкоамилазой Rhizopus de- lemarB в течение 48 ч конечным продуктом является глюкоза, тогда как при гидролизе крахмала глюкоамилазой Aspergillus awamori в гидролизатах содержатся глюкоза, мальтоза и следы олигосахаридов.
Высокоосахаренные ферментативные гидролизаты применяют как улучшители качества изделий, не содержащих сахар. При внесении гидролизата в опару или тесто в количестве 3% к массе муки в тесте повышается бродильная активность хлебопекарных прессованных дрожжей, интенсифицируется процесс брожения. Это позволяет сократить продолжительность приготовления теста на 15-20% при улучшении показателей качества изделий (Л. П. Пащенко, 2002). Рекомендуется применение таких гидролизатов как заменителей сахара при производстве хлебобулочных изделий. При этом продолжительность брожения теста сокращается на 11%. Изделия получаются хорошего качества.
Высокоосахаренные ферментативные гидролизаты с успехом могут применяться для предварительной активации (адаптации) прессованных дрожжей. Наибольший эффект достигается при следующем составе питательной смеси: высокоосахаренный ферментативный гидролизат, мука и вода в соотношении 5:1:2 соответственно.
Глюкоамилаза очищенная ТУ 64-13-18-88 (оптимальные условия действия: рН 3,0-5,0; температура 55-60°С) — препарат, продуцентом которого являются гриб Aspergillus awamori или штамм дрожжей Endomycopsis sp. 20-9, находит применение при производстве высокоосахаренных ферментативных полуфабрикатов и жидких дрожжей.
Ферментные препараты с активной β-галактозидазой. β-галактозидаза. Ее выделяют из культуры дрожжей Saссharomyces fragilis. Оптимум ее действия находится в интервале рН 6,7-6,9. Ферментный препарат β-галактозидазы позволяет увеличить дозировку в тесто сухого обезжиренного молока с 5 до 15-20%. β-галактозидаза гидролизует лактозу до глюкозы и галактозы. Обогащение среды глюкозой интенсифицирует процессы спиртового брожения, вызываемого дрожжами в тесте; галактоза же участвует в молочнокислом брожении и в реакции меланоиди- нообразования.
Одновременно с β-галактозидазой рекомендуется вносить в опару Амилоризин П10х, а в тесто — улучшитель окислительного действия. В результате такого технологического приема возможно получить изделия с повышенным содержанием сухого молока, характеризующиеся высокими показателями качества, кроме того, в них вдвое повышается содержание ароматических веществ.
Ферментный препарат β-галактозидазы может быть выделен также из глубинной культуры гриба Alternaria tenuis, причем оптимум ее действия находится в интервале рН 4,6-5,0, что максимально близко к условиям приготовления теста.
Протеолитические ферментные препараты. Ферментные препараты этой группы применяют для регулирования структурно-механических свойств клейковины муки. В технологии хлеба применяются протеазы грибного и бактериального происхождения. Бактериальные протеазы резко увеличивают растяжимость клейковины, уменьшая ее эластичность. Грибные протеазы увеличивают растяжимость клейковины постепенно, при этом эластичность ее улучшается. Такой селективный гидролиз пептидных связей присущ грибным протеазам, проявляющим активность в нейтральной и слабокислой среде. Введение протеаз способствует пластификации теста, вследствие чего оно становится легко растяжимым, и хлеб имеет больший объем. Протеолитические ферментные препараты применяются при производстве изделий, технология которых требует особенно легкого, подвижного и растяжимого теста. В качестве препаратов бактериальной протеазы могут быть использованы препараты Протосубтилин Г10х и 20х, Протозим (ТУ 9152-030-34588571-98), Нейтраза, Grindamyl PR.
Целлюлолитические ферментные препараты. Ферментные препараты этой группы применяют для стабилизации физико-механических свойств теста, улучшения структуры мякиша хлебобулочных изделий, увеличения их объема и пористости. При производстве хлеба из ржаной муки или из смеси ржаной и пшеничной муки целлюлолитические ферментные препараты замедляют процессы черствения. Эффективно применение этих препаратов при выработке хлеба из цельносмолотого зерна с добавлением отрубей и других компонентов с повышенным содержанием некрахмалистых полисахаридов.
В таблице 15.4 приведены данные о содержании основных групп некрахмалистых полисахаридов — целлюлозы и гемицеллюлоз, в зерне некоторых культур.
Целлюлоза— главный природный полимер, являющийся составной частью всех органов и тканей растений; относится к регулярным линейным полимерам глюкозы, в котором остатки глюкозы связаны р-1,4-гликозидной связью. Степень полимеризации в отрубях пшеницы и ржи составляет около 1000 глюкозных единиц. Молекулы целлюлозы имеют плоскую зигзагообразную форму. Кольца глюкозы лежат в одной плоскости, их вращению вокруг гликозидной связи препятствуют водородные связи между гидроксильной группой при С3 и кислородным атомом пиранозного кольца (рис. 15.6).
Целлюлоза — один из наиболее трудно гидролизуемых природных полимеров. В организме высших животных и человека не синтезируются ферменты, гидролизующие целлюлозу. Ее биодеградацию осуществляют ферменты микроорганизмов. Например, целлюлоза, входящая в состав пищевых волокон, микрофлорой толстого кишечника человека расщепляется до 70%.
В гидролизе целлюлозы участвуют три основные группы ферментов. Эндо-β-1,4-глюканазы катализируют неупорядоченное расщепление целлюлозных молекул на крупные фрагменты. При действии экзо-β-1,4-глюканазы, или целлобиогидролазы от нередуцирующего конца целлюлозных молекул или их фрагментов отщепляется целлобиоза. Целлобиазы β-глюкозидазы) катализируют гидролиз целлобиозы и, с меньшей скоростью, небольшие целлоолигосахариды (целлотетрозу и целлопентозу) с образованием глюкозы. Некоторые микроорганизмы синтезируют экзо-β-1,4-глюкозидазу, под действием которой от нередуцирующего конца целлюлозных субстратов отщепляется глюкоза.
Индивидуальные эндо- и экзоглюканазы способны расщеплять нативную целлюлозу, однако в природе этот процесс происходит обычно под действием комплекса ферментов. Целлюлазные комплексы микроорганизмов и высших базидиальных грибов включают до 20 ферментных белков, среди которых, как правило, есть и эндо-, и экзоферменты.
Для гидролиза целлюлозы применяются комплексные ферментные препараты, выделяемые из культур микроскопических грибов и актиномицетов и обладающие эндоглюканазной, целлобиогидролазной и целлобиазной активностью. Отдельные компоненты целлюлазных комплексов грибов и актиномицетов проявляют наибольшую активность при рН от 3,7 до 5,5, а комплексы в целом — при рН 4,5-5,5. Оптимальная температура действия отдельных компонентов — от 45 до 80°С, комплексов — 50-60°С.
Среди гемицеллюлоз наиболее значимы ксилоглюкан, ксиланы, глюкоманнаны, глюкогалактоманнаны, арабиноглюкуроноксилан. Гемицеллюлозы имеют структуры, способные агрегироваться с целлюлозой за счет водородных связей. Все гемицеллюлазные ферменты можно разделить на три группы: р-Д-глюканазы, р-ксиланазы и р-глюко- зидазы.
К β-D-глюканазам относится группа ферментов, катализирующих расщепление β-глюканов с β-1,2-, β-1,3-, β-1,4- и β-1,6-связями.
Все β-глюканазы являются кислыми белками, содержащими большое количество карбоксильных и гидроксильных групп. Эти ферменты являются гликопротеидами, они имеют углеводные фрагменты, содержащие остатки маннозы, глюкозы, галактозы.
К β-ксиланазам относятся ферменты, катализирующие расщепление р-гликозидных связей в β-ксиланах.
У большинства микроорганизмов, продуцирующих ксиланазы, найдено два типа ферментов, гидролизующих основную цепь ксиланов: эндо-1,3-β-ксиланазы (ММ 1650 кДа) и экзо-1,4-β-ксилозидазы (ММ 30-100 кДа). Оптимум действия ксиланаз наблюдается при рН от 4 до 7 и при температуре от 30 до 50°С.
Эти ферменты известны под названиями: генциобио-за, амигдалаза и целлобиаза. β-глюкозидаза является ферментом экзогенного действия, гидролитически расщепляющим последнюю от нередуцирующего конца β-1,4-связь в β-Д-глюкозидах, высвобождая β-Д-глюкозу. β-глюкозидаза проявляет широкую субстратную специфичность; некоторые ферменты этой группы гидролизуют также β-Д-галактозиды, β-Х-арабинозиды или β-Д-ксилозиды.
Преобладающими гемицеллюлозами злаковых культур являются пентозаны (ксиланы), составляющие 2,5-4% пшеничной и около 8% ржаной муки, в частности арабиноглюкуроноксилан. Пентозаны представлены водорастворимой (0,5%) и нерастворимой (1,9%) фракциями пшеничной муки. Пентозаны влияют на реологические свойства теста, обусловливая его устойчивость к растяжению. Нерастворимые пентозаны образуют с белками клейковины поперечные связи, оказывая тем самым влияние на упругие свойства теста и качество хлеба. Растворимые пентозаны обладают высокой водосвязывающей способностью, чем существенно влияют на водопоглотительную способность теста.
Гидролиз нерастворимых пентозанов пентозаназами (ксиланазами) предотвращает образование комплексов пентозанов с клейковиной. Продукты частичного их гидролиза способствуют коагуляционным процессам — образованию гидратированного клейковинного каркаса. Продукты гидролиза — ксилоолигосахариды препятствуют взаимодействию крахмала с белками, что замедляет процесс черствения хлеба. Образующиеся в результате гидролиза пентозанов арабиноза и ксилоза, принимают участие в обеспечении питанием молочнокислых бактерий и в процессах меланоидинообразования. При недостаточном содержании гемицеллюлаз (арабинозидазы, экзоксиланазы, ксилобиазы), которые повышают долю растворимых пентозанов в тесте и соответственно доступность SH-групп белков, снижается водопоглотительная и газоудерживающая способность теста. При введении в пшеничную муку пищевых волокон (отрубей, ячменных оболочек, микрокристаллической целлюлозы, цельносмолотого зерна, соевых волокон и др.) массовая доля муки снижается и уменьшается количество связанной воды в тесте. Тесто становится мягким, липким или слишком жестким, трудно обрабатывается на машинах тесторазделочных линий. Среди кси- ланаз наиболее эффективны как улучшители хлебопекарных свойств муки те, которые имеют высокую активность как к растворимым, так и к нерастворимым пентозанам. При производстве хлеба пентозаназы и ксиланазы могут быть легко передозированы, что приведет к чрезмерному расщеплению пентозанов муки и снижению ее водосвязывающей способности, сделает тесто липким и маловязким.
С целью увеличения длительности сохранения свежести хлеба препараты гемицеллюлаз применяются совместно с амилолитическими ферментами. Датская компания Novozymes A/S производит препарат Fungamyl Super, проявляющий амилолитическую и пентозаназную (ксиланазную) активность. Этот препарат улучшает водопоглотительную способность муки и повышает эластичность клейковины. Препарат рекомендуется использовать при переработке муки с пониженной газообразующей способностью и низкой автолитической активностью. Ферменты инактивируются в процессе выпечки тестовых заготовок. При внесении в тесто препарата Fungamyl и препарата Novamyl (фирма Novozymes A/S, Дания), содержащего бактериальную α-амилазу, период сохранения свежести хлеба без упаковки увеличивается с 12 до 96 ч, улучшаются реологические свойства хлеба: набухаемость мякиша хлеба увеличивается на 30-40%, а его сжимаемость — на 17-44%. При добавлении препаратов гемицеллюлаз Veron HE и Veron ST, производимых немецкой корпорацией Rohm. Tech. Inc. Malden, к пшеничной муке с добавлением 30% муки из цельносмолотого зерна увеличиваются объем хлеба и длительность сохранения его свежести.
Ферментный препарат Pentopan Mono (фирма Novo- zymes A/S, Дания) проявляет пентозаназную активность, гидролизуя растворимые и нерастворимые пентозаны муки; препарат Pentopan BG обладает широким спектром ксиланазной (пентозаназной) и гемицеллюлазной активности. Pentopan 500 BG представляет собой очищенный препарат фермента, полученного при культивировании Humicola insolens и проявляющего пентозаназную и геми- целлюлазную активность (оптимальные условия: рН 5-6 и температура 40°С). Эти препараты увеличивают гибкость глютенового каркаса. Их применение позволяет увеличить водопоглотительную способность муки, улучшить структурно-механические свойства теста, увеличить объем хлеба.
Ферментные препараты фирмы Danisco (Дания) Grin- damyl Н, Grindamyl XV и Grindamyl S, обладающие гемицеллюлазной активностью и воздействующие на нерастворимые пентозаны, применяются для регулирования водопоглотительной способности муки, улучшения реологических свойств теста, увеличения стабильности тестовых заготовок при расстойке.
Липолитические ферментные препараты. Ферментные препараты этой группы, к которым относятся липазы, оказывают положительное влияние на реологические свойства теста, улучшая качество клейковины за счет образования дополнительных водородных связей и гидрофобных взаимодействий между модифицированными гликолипидами и белками клейковины. Есть основания предполагать, что липазы оказывают косвенное влияние как на белковую, так и на крахмальную составляющие муки.
Ферментные препараты липазы с успехом применяются в технологии хлеба вместо эмульгаторов. В комплексе с препаратами, обладающими гемицеллюлазной и амилазной активностями, липазы обеспечивают заметное увеличение объема хлеба, полученного из смеси муки различных зерновых культур. При получении французских багетов применение этого комплекса препаратов обеспечивает однородность мякиша, предотвращает чрезмерное брожение, приводит к увеличению удельного объема изделий на 35-38%. Добавление к комплексу мальтогенной бактериальной а-амилазы позволяет получить дополнительный эффект — не черствеющий в течение 9 сут хлеб. Эластичность мякиша такого хлеба на 9-е сутки хранения такая же, как у трехдневного хлеба, полученного с применением 0,5% моноглицеридов. Ферментные препараты фирмы Danisco (Дания) Grindamyl EXEL (содержит липазу) и Grindamyl POWER Bake (содержит гликолипазу), обладающие липолитической активностью, улучшают структурно-механические свойства хлебного мякиша, продлевают период сохранения его свежести.
Комплексный таблетированный ферментный препарат Grindamyl POWER Bake 4401 Tab помимо липазной обладает также амилазной и гемицеллюлазной активностью. Он применяется как при безопарных ускоренных, так и при традиционных опарных способах приготовления теста. Рекомендуется для изделий с низким содержанием жира в рецептуре. При минимальной дозировке (16-32 г на 100 кг муки) Grindamyl POWER Bake 4401 Tab позволяет получить максимальную эффективность улучшения свойств полуфабрикатов и качества изделий: улучшить реологические свойства теста; ускорить процессы брожения теста и окончательную расстойку тестовых заготовок; повысить стабильность тестовых заготовок при расстойке; увеличить удельный объем изделий; улучшить структуру мякиша, цвет и состояние верхней корки. Применение этого препарата делает качество хлеба менее зависимым от хлебопекарных свойств муки.
Фирма Novozymes A/S (Дания) разработала ферментный препарат Lipopan F BG, который содержит липазу грибного происхождения (продуцент Aspergillus oryzae), гидролизующую 1,3-эфирные связи в триглицеридах. Он проявляет избирательную активность по отношению к фосфолипидам, гликолипидам и триглицеридам. Препарат может быть использован для полной или частичной замены пищевых эмульгаторов. Lipopan F BG улучшает свойства теста при механической обработке, повышает его стабильность, улучшает качество изделий при дозировке препарата 0,15-6,00 г на 100 кг муки. При применении препарата липазы Novozym 766 BG (фирма Novozymes A/S, Дания) улучшаются свойства клейковины, увеличивается удельный объем изделий, структурно-механические свойства мякиша, замедляется процесс черствения хлеба.
Липоксиглюкоаваморин — комплексный ферментный препарат, основным ферментом которого служит липоксигеназа. Этот фермент катализирует окисление кислородом воздуха ненасыщенных высокомолекулярных жирных кислот и образуемых ими сложных эфиров. С наибольшей скоростью липоксигеназа катализирует окисление лино- левой, линоленовой и арахидоновой кислот, которые играют важную роль в производстве пищевых продуктов. Окисление ненасыщенных жирных кислот при участии липоксигеназы приводит к образованию пероксидов и гидропероксидов, которые, обладая высокой окислительной способностью, окисляют новые порции ненасыщенных жирных кислот и каротиноидов. Очевидно, таким путем происходит сопряженное окисление хромофорной группировки каротина пшеничной муки, вызывающее его обесцвечивание.
Содержащиеся в препарате другие ферменты, в частности, глюкоамилазы и некоторое количество а-амилазы и протеазы, также положительно влияют на процесс приготовления теста. Это выражается, прежде всего, в увеличении степени и скорости гидролиза крахмала и белков муки до легкоусвояемых сахаров, пептидов и аминокислот, способствующих развитию дрожжевых клеток и молочнокислых бактерий, сокращению процесса брожения, улучшению качества изделий и уменьшению степени их черствения. Таким образом, липоксиглюкоаваморин служит в основном для отбеливания, увеличения пористости (объема) и продления срока свежести изделий.
Окислительно-восстановительные ферментные препараты. Ферментные препараты этой группы применяют в технологии хлеба для регулирования реологических свойств теста путем селективного изменения клейковины. В качестве ферментов-окислителей применяют ли- поксигеназу, комплекс глюкозооксидазы и каталазы или комплекс, включающий липоксигеназу, пероксидазу и каталазу. Окислительные системы с липоксигеназой и глюкозооксидазой существенно влияют на реологические свойства теста: упругость теста повышается в первом случае на 79%, во втором — на 75%, растяжимость теста снижается соответственно на 18 и 25%. Возрастает стабильность и эластичность теста, интенсивность газообразования при брожении.
Фермент липоксигеназа катализирует окисление цисформы линолевой, линоленовой и арахидоновой ненасыщенных жирных кислот с образованием в основном гидропероксидов, которые являются активными окислителями. Гидропероксиды вызывают окисление SH-групп в молекулах белков, протеолитических ферментов и активатора протеолиза — глутатиона. Окисление SH-групп протеаз и глутатиона инактивирует их, а в белках муки приводит к образованию дополнительных дисульфидных связей. В результате этого белки упрочняются, структура их делается более жесткой. Гидропероксиды также обесцвечивают ксантофилловые и каротиноидные пигменты муки, что приводит к ее осветлению. Поскольку субстратами липоксигеназы служат свободные жирные кислоты, целесообразно вносить препарат липазы, а процесс окисления проводить в тесте, содержащем жиры. Активность липоксигеназы в зерне пшеницы и в пшеничной муке относительно низкая. Липоксигеназная активность бобов сои в 10-20 раз выше, чем в зерне пшеницы и других злаковых. Поэтому необезжиренная соевая мука, не подвергавшаяся термической обработке и полученная из нативных бобов сои, является природным препаратом липоксигеназы.
В настоящее время на основе ферментативно-активной соевой муки производят комплексные хлебопекарные улучшители: Magimix (Франция), «Меркурий», «Венера», «Кэмбридж» (Великобритания), «Союшка» (Россия).
Фермент глюкозооксидаза катализирует окисление глюкозы кислородом с образованием γ-глюконолактона. Глюкозооксидаза применяется в комплексе с каталазой. При окислении глюкозы глюкозооксидазой образуется глюконовая кислота и пероксид водорода — активный окислитель. Свободный пероксид водорода, не участвующий в окислительных процессах (избыточный), должен быть удален из системы, что достигается с помощью каталазы, разлагающей пероксид водорода на воду и кислород. Улучшение качества хлеба с глюкозооксидазой достигается при ее совместном применении с аскорбиновой кислотой. Система, включающая глюкозооксидазу, может активно действовать при наличии глюкозы, которая появляется при гидролизе сахарозы и мальтозы дрожжевыми ферментами β-фруктофуранозидазой и α-глюкозидазой. Поэтому применение глюкозооксидазы эффективно при высокой ферментативной активности дрожжей. Для повышения содержания в среде мальтозы вводят препарат грибной мальтогенной а-амилазы. Окислению сульф- гидрильных групп белков препятствуют ассоциированные с ним ксиланы. Для повышения доступности белков используют ксиланазы. Значительное увеличение удельного объема хлебобулочных изделий наблюдается при использовании комплексного улучшителя, включающего глюкозооксидазу, каталазу, аскорбиновую кислоту, грибную амилазу и ксиланазу. С целью предотвращения чер- ствения такая мультиэнзимная композиция может быть дополнена бактериальной а-амилазой.
Фирма Danisco (Дания) выпускает препарат глюкозо- оксидазы Grindamyl SURE bake. Фирмой Novozymes A/S (Дания) производится ферментный препарат глюкозоок- сидазы Gluzym Mono 10000 BG, рекомендуемая дозировка которого составляет 0,3-5,0 г на 100 кг муки.
Ферментные препараты для замороженных полуфабрикатов. Ферментные препараты применяются для улучшения качества хлебобулочных изделий из замороженных полуфабрикатов. При замораживании теста вследствие образования кристаллов льда происходит повреждение дрожжевых клеток и разрушение трехмерной структуры белков, приводящее к ослаблению клейковины. Поэтому замороженные хлебобулочные полуфабрикаты требуют более длительной выдержки перед выпечкой, а изделия из замороженного теста часто имеют недостаточный объем и неудовлетворительное качество. Этого можно избежать путем добавления ферментных препаратов, способствующих усилению газообразования в тесте и упрочнению структуры клейковины. Наиболее часто применяются препараты, содержащие такие ферменты как α-амилаза, ксиланаза и глюкозооксидаза или различные композиции этих ферментов.
При выпечке заготовок из теста, замороженного сразу после замеса и хранившегося в течение 14 недель при -18°С, отмечено значительное увеличение объема и улучшение структуры мякиша (увеличение общей деформации и эластичности) при включении в рецептуру теста, помимо аскорбиновой кислоты и эмульгатора, ферментных препаратов ксиланазы и грибной α-амилазы. При включении в рецептуру хлеба, помимо аскорбиновой кислоты и эмульгатора, ферментных препаратов ксиланазы, грибной а-амилазы и глюкозооксидазы наблюдается еще большее увеличение его объема, но только при условии хранения замороженных полуфабрикатов не более 40 дней. При большем периоде хранения объем выпеченных изделий был меньше, чем в случае использования только ферментных препаратов ксиланазы и грибной α-амилазы. Добавление ферментных препаратов дает не такой выраженный эффект, если тесто подвергается замораживанию после полной или частичной расстойки. Однако в этом случае, при добавлении ферментных препаратов ксиланазы, грибной α-амилазы и глюкозооксидазы объем булочных изделий, выпеченных после двухмесячного хранения в замороженном состоянии, был на 30% больше, чем объем изделий, не содержавших ферментные препараты. Замороженные после частичной выпечки и хранившиеся 3 мес. при температуре -18°С багеты имели больший объем и лучший цвет при добавлении в тесто ферментных препаратов ксиланазы, грибнойα-амилазы и глюкозооксидазы.
Булочные изделия, выпеченные из теста, замороженного после частичной выпечки, имели лучшие объем и внешний вид при добавлении в тесто такой композиции ферментных препаратов. Изделия имели правильную форму и при их разрезании половинки удерживались вместе, что важно, если это булочки для хот-догов или сэндвичей.
Хлеб, выпеченный из замороженных полуфабрикатов, содержавших ферменты, дольше сохранял свежесть, чем хлеб из замороженных полуфабрикатов с эмульгаторами- моноглицеридами. На пятые сутки хранения при 24°С хлеб, выпеченный из замороженных полуфабрикатов, содержавших препарат мальтогенной а-амилазы или ее комбинацию с грибной амилазой и ксиланазой, имел более эластичный мякиш, чем хлеб из замороженных полуфабрикатов с эмульгаторами и даже свежевыпеченный хлеб.
Для улучшения структуры, пористости, цвета мякиша и увеличения объема изделий из замороженных полуфабрикатов применяются эффективные ферментные препараты: Lipopan 50 BG (фирма Novozymes A/S, Дания), содержащий липазу; Pentopan 500 BG, Fungamyl Super АХ (фирма Novozymes A/S, Дания), содержащие ксиланазу; AMG 1000 BG, содержащий α-амилазу.