Сыры, вырабатываемые с помощью плесневых грибов, составляют небольшой процент от общего производства сыров, но благодаря специфическому, хорошо выраженному вкусу и аромату, нежной консистенции они становятся все более популярными. Они подразделяются на сыры с поверхностным ростом плесневых грибов и сыры с развитием плесневых грибов по всей массе (интерьеру). Из плесневых грибов в сырах первого класса главную роль играет Penicillium camemberti, в сырах второго класса - Penicillium roqueforti.
Penicillium camemberti
Применяемые в сыроделии виды плесневых грибов подробно описаны французскими учеными. Ранее выделяли два вида этого микроорганизма: Р. caseicolum (старое название Р. candidum), всегда имеющий мицелий белого цвета, и Р. camemberti (старое название Р. album - белая плесень), мицелий которого сначала белый, а на 10-14 сут приобретает бледную серо-зеленую окраску. Р. album образует пушистый мицелий. Р. caseicolum образует мицелий трех видов: плотный, с короткими, тесно перевитыми нитями; с длинными, высокими, свободно расположенными нитями и типа «невшатель» (neufchatel), очень быстро образующийся толстый, бело-желтый мицелий. Последний вариант обладает самой высокой протеолитической и липолитической активностью. В настоящее время Р. caseicolum рассматривают как белый мутант Р. camemberti. Местом обитания Р. camemberti является поверхность некоторых сыров и помещения вырабатывающих эти сыры заводов, особенно камеры для созревания и солильные бассейны. По сравнению с другими видами пенициллов растет медленно: 25-35 мм на сусло- агаре за две недели при 25° С, причем белый мутант растет более медленно. Время до появления светло-зеленой окраски мицелия может варьировать в широких пределах (от 4 до 14 сут при 22° С).
Предельная концентрация соли для роста выше 20%, скорость роста падает при увеличении содержания соли больше 10%; 1-2% соли стимулирует рост на твердой среде.
Большинство штаммов хорошо растет при pH 3,5-6,5, но лишь некоторые, полученные в результате селекции, растут при щелочном pH. По другим данным, нормальный рост наблюдается при pH 3,0-9,5, оптимальный pH для образования конидий 4,5, для роста мицелия 7,0. Р. camemberti образует по крайней мере две протеиназы: кислую (расщепляет аs1 и β-казеины) и нейтральную (действует на β-казеин), две внеклеточные карбоксипептидазы и аминопептидазу с относительно высоким оптимальным pH.
Суспензию спор Р. camemberti наносят на поверхность сыров с помощью ватного тампона или пульверизатора, а также распыляют в камерах для созревания. Физико-химические условия на поверхности сыров неблагоприятны для прорастания спор. Для ускорения развития Р. camemberti, французские ученые предложили обсеменять поверхность сыров не спорами, а мицелием, который выращивают на сывороточной среде при периодическом перемешивании в течение 1-3 сут. Это на 30% сокращает период между инокулированием сыра и появлением видимого роста плесени на поверхности головки, а также повышает качество сыра.
На поверхности сыров типа Камамбер часто вырастает Мисог, развитие которого вызывает пороки продукта. Между этим плесневым грибом и Р. camemberti существуют отличия, которые можно использовать для регулирования их роста: рост Мисог существенно ингибируется при Ав меньше 0,92, рост Р. camemberti при Ав меньше 0,86; обе плесени имеют оптимальную температуру для роста 20-26° С, но Р. camemberti быстрее растет при 12-16° С; Мисог имеет узкий диапазон pH для развития (около 5,0), Р. camemberti растет в широком диапазоне pH. В связи с этим, нужно строго соблюдать технологию выработки сыра. При значительном обсеменении свежего сыра Мисог необходимо прервать его цикл спорообразования и ускорить рост микрофлоры закваски. Особенно опасно загрязнение этим грибком сыра Камамбер перед посолкой и в первые 12-24 ч после посолки. Р. camemberti ингибирует рост токсинообразующих плесеней.
Penicillium roqueforti
В отличие от Р. camemberti, Р. roqueforti широко распространен в природе. Он не имеет ничего общего с Р. glaucum, с которым его отождествляли ранее в литературе. Близок к нему Р. verrucosum var. cyclopium, который иногда загрязняет культуры плесневых грибов для сыроделия, но Р. roqueforti не имеет запаха, который напоминает запах сырой земли; иногда его называют «запах дикой плесени». Кроме этого, они отличаются морфологическими и культуральными свойствами, отношением к кислороду и СО2, скоростью роста. На среде с 63 г/л ацетата натрия растет только Р. cyclopium. Развитие Р. cyclopium в сыре ведет к появлению горького вкуса и сопровождается образованием токсинов.
Оптимальная температура для Р. roqueforti 35—40° С, но он растет хорошо и при низких температурах. При 7° С все штаммы, кроме одного, дали достаточно быстрый рост. Растет при pH от 3 до 10,5, но при 4,0 лучше, чем при 6,0. Рост не прекращается даже в присутствии 5% молочной кислоты.
Концентрация соли 6-8% тормозит рост некоторых штаммов, хотя предельная концентрация соли больше 20%. Низкие концентрации соли (1-3%) стимулируют рост. Оптимальная концентрация соли 1-3%.
Р. roqueforti образует внеклеточные кислую и нейтральную протеиназы, расщепляющие и æ-казенны.
Очень ценной для производства сыров особенностью этого вида является способность расти при низком парциальном давлении кислорода. Он растет в среде с 5% кислорода; рост его стимулируется СО2 . Однако эта особенность делает его наиболее опасным возбудителем плесневения других сыров, в которых рост плесневых грибов вызывает пороки.
Распространенным пороком сыров с развитием плесневых грибов по всему интерьеру является горечь, обусловленная образованием горьких пептидов из казеина. Р. roqueforti в зависимости от штамма расщепляет горькие пептиды, образуемые в сыре при совместном действии молокосвертывающих энзимов и протеиназ бактерий, или содействует их образованию. Штаммы, способные расщеплять горькие пептиды, можно обнаружить путем их культивирования в обезжиренном молоке с протеазой «Мезентерии ГР» в течение 30 сут. Мезентерии в течение 4 сут, предшествующих внесению в среду испытываемого штамма, образует в среде горькие пептиды, которые «негорькие» штаммы разрушают при последующей инкубации. Результаты этой пробы коррелируют с отсутствием горечи в сырах, выработанных с применением отобранных штаммов плесневого гриба.
Сухие препараты Р. roqueforti готовят централизованно, используя хлеб в качестве основы среды для накопления его биомассы. Вносят их из расчета 3-4 г/100 кг молока.
Другие виды плесневых грибов
Кроме описанных выше в некоторых странах в сыроделии используют другие виды плесневых грибов. Во Франции вырабатывают полутвердые сыры Сен Нектэр и Томе де Савойе, поверхность которых покрыта газоном из смеси плесневых грибов родов Penicillium, Мисог, Cladosporium, Geotrichum, Epicoccum и Sporotrichum. В Италии вырабатывают сыр Талледжио с поверхностным ростом Penicillium и Мисог, сыр Робиола с Geotrichum. В Норвегии вырабатывают термокислотным свертыванием из обезжиренного молока сыр Гамелост с использованием Мисог на поверхности и в интерьере сыра. При его выработке молоко сквашивают и нагревают при 65° С, осажденный белок формуют и выдерживают около 2 ч в кипящей сыворотке. На следующий день его опрыскивают суспензией плесени или опрыскивают и прокалывают головки обсемененными плесенью иглами. Сыр имеет коричневую окраску поверхности и коричнево-желтую окраску интерьера.
Сыры, вырабатываемые с отличными от Р. camemberti и Р. roqueforti видами плесневых сыров, имеют региональное значение.
Молочнокислые бактерии
Для производства большинства грибных сыров используют обычные лактококковые закваски с лейконостоками (разд. 8.1). Лейконостоки придают массе сыра пористость, что способствует более равномерному и интенсивному росту плесневых грибов. В Италии для производства сыра Талледжио, Горгонзола применяют закваски болгарской палочки и термофильного стрептококка или молоко, свернувшееся при 40-44° С (для выработки сыров Италико и Крешенца). В естественных заквасках доминирует термофильный стрептококк. Болгарская палочка и термофильный стрептококк стимулируют протеолитическую активность Р. roqueforti путем образования низкомолекулярных пептидов. Состав заквасок оказывает сильное влияние на качество сыра Камамбер. В совместных культурах с молочным лактококком и Lbc. casei рост пенициллов замедлялся. Японские исследователи отмечают важную роль лактококков в трансформации продуктов протеолиза плесневыми грибами во вкусовые и ароматические соединения Камамбера и считают необходимым отбор штаммов лактококков в закваски для этих сыров.